TMEM16A在肺動脈高壓大鼠心肌組織的表達及分布.pdf

1、目的：初步研究TMEM16A在正常大鼠和肺動脈高壓大鼠心肌組織中的表達差異，旨在探討TMEM16A在肺動脈高壓所致右心室肥厚(Right Ventricular Hypertrophy, RVH)形成過程中可能的作用機制。
　　方法：(1)選取健康雄性 SD大鼠30只，隨機分為兩組：對照組(n=12)和肺動脈高壓組(n=18)。對照組大鼠腹腔注射磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered saline，PBS)；肺動脈高壓

2、組大鼠腹腔注射野百合堿(monocrotaline, MCT)(50 mg/kg,10 mg/ml PBS)，每天給予大鼠稱重，記錄其體重增長情況，并觀察其外觀、行為表現(xiàn)、飲食等一般情況，飼養(yǎng)21 d后將大鼠全部處死，取心臟和肺組織備用。(2)驗證肺動脈高壓模型成功：(a)稱重法計算右心室肥厚指數(shù)(right ventricular hypertrophy index， RVHI)、右心重/體重(RVW/BW)、左心重/體重((LV+S

3、)W/BW)、全心總重/體重(V/BW)；(b)采用右心導管法測右心室壓力(mean right ventricular pressure, mRVP)。(3)大鼠心肺組織大體。(4)HE染色觀察心、肺組織形態(tài)學改變；運用 Image-J圖像分析軟件測定肺小動脈血管參數(shù)中膜厚度百分比(medial wall thickness％，WT%)及管壁面積百分比(wall area%，WA%)。(5)運用qRT-PCR技術分別檢測兩組大鼠右心室

4、和左心室TMEM16A mRNA表達水平。(6)運用Western blot技術分別檢測兩組大鼠右心室和左心室TMEM16A蛋白的表達。
　　結果：(1)與對照組比較，肺動脈高壓組大鼠毛發(fā)直立，呼吸急促，飲食量減少，體重增長幅度自第7 d至第21 d具有明顯的統(tǒng)計學差異(P<0.001)。(2)與對照組比較，肺動脈高壓組大鼠RVHI、RVW/BW均顯著增高(P<0.01)，(LV+S)W/BW，V/BW的增加幅度無統(tǒng)計學差異，mR

5、VP顯著增加(P<0.001)。(3)肉眼可見肺動脈高壓大鼠右心室游離壁顯著增厚；肺組織表面灶狀淤血彈性差。(4)與對照組相比 HE染色顯示肺動脈高壓組大鼠心肌纖維粗大，心肌纖維排列紊亂，心肌細胞肥大，形狀不規(guī)則周圍伴炎性細胞浸潤；肺動脈中膜增厚，周圍大量炎癥細胞浸潤，肺血管內皮細胞增殖，血管閉塞，肺泡間隔增厚伴大量炎細胞浸潤；WT%和WA%顯著增高(P<0.001)。(5)肺動脈高壓組大鼠右心室TMEM16A mRNA表達量較對照組大

6、鼠顯著降低(P<0.001)；肺動脈高壓組大鼠左心室TMEM16A mRNA表達量較對照組亦降低，有統(tǒng)計學差異(P<0.01)。(6)肺動脈高壓組大鼠右心室 TMEM16A蛋白表達較對照組大鼠降低(P<0.01)；肺動脈高壓組左心室 TMEM16A蛋白表達較對照組亦降低，均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　結論：(1)在肺動脈高壓大鼠右心室組織中 TMEM16A mRNA和蛋白的表達水平顯著降低，提示TMEM16A可能與右心室肥