外周血T淋巴細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子在腎移植受者無(wú)創(chuàng)性動(dòng)態(tài)免疫監(jiān)測(cè)、預(yù)示及臨床評(píng)價(jià)應(yīng)用研究.pdf

1、背景：
　　移植腎急性排斥反應(yīng)多發(fā)生在移植術(shù)后三個(gè)月內(nèi)。目前臨床用于評(píng)價(jià)及預(yù)示移植腎功能的常用指標(biāo)血清肌酐（SCr）具有一定的診斷延遲性。金標(biāo)準(zhǔn)移植腎穿刺活檢鑒于其有創(chuàng)性帶來(lái)的并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)，尚無(wú)法用于術(shù)后頻繁的連續(xù)性監(jiān)測(cè)。目前移植臨床上亟待發(fā)現(xiàn)新的無(wú)創(chuàng)生物標(biāo)記，及早預(yù)判移植臨床免疫反應(yīng)和識(shí)別干預(yù)治療的效果。本研究通過(guò)評(píng)估不同無(wú)創(chuàng)監(jiān)測(cè)指標(biāo)在急性排斥反應(yīng)中免疫監(jiān)測(cè)、識(shí)別與評(píng)價(jià)的價(jià)值，并對(duì)其免疫預(yù)示及預(yù)警和急性排斥反應(yīng)診斷的有效性及其臨床

2、意義提出自己的觀點(diǎn)，從而為促進(jìn)腎移植受者及移植腎長(zhǎng)期生存提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　以本腎移植中心自2014年1月至2015年12月，移植術(shù)后2個(gè)月內(nèi)發(fā)生急性排斥反應(yīng)的10例腎移植受者和同期腎功能穩(wěn)定未發(fā)生急性排斥反應(yīng)的34例腎移植受者為研究對(duì)象，通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)外周血CD4+CD25+、CD4+CD25+CD127low、CD45RO+、CD45RA+、CD3+CD4+、CD3+CD8+等T細(xì)胞亞群的絕對(duì)計(jì)數(shù)和相對(duì)

3、百分比，采用固相酶標(biāo)記化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)測(cè)定移植術(shù)后第1、2、4周AR組和腎功能穩(wěn)定組的血清白介素IL-2R，IL-6,IL-8,IL-10,TNF-α等細(xì)胞因子的數(shù)值。通過(guò)兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、多元線(xiàn)性回歸、受試者工作特征曲線(xiàn)，分析外周血T淋巴細(xì)胞亞群以及細(xì)胞因子定量的變化與移植腎免疫狀態(tài)的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1）急性排斥反應(yīng)診斷前期：CD4+CD25+CD127low-Treg百分比AR組顯著低于Stable組；ROC

4、曲線(xiàn)分析AUC=0.893（P<0.05）。CD4+CD45RA+百分比在 AR組顯著低于Stable組；ROC曲線(xiàn)分析AUC=0.867（P<0.05）。CD4+CD45RO+百分比AR組顯著低于Stable組；ROC曲線(xiàn)分析AUC=0.953（P<0.05）。CD4+CD25+T細(xì)胞百分比比值在AR組低于Stable組；ROC曲線(xiàn)分析AUC=0.732（P=0.11）。
　　2）急性排斥反應(yīng)診斷期：CD4+CD25+CD127

5、low-Treg外周血中百分比在AR組顯著低于Stable組；ROC曲線(xiàn)分析AUC=1.0（P<0.05）。CD4+CD45RA+外周血百分比在AR組顯著低于Stable組；ROC曲線(xiàn)分析AUC=0.825（P<0.05）。CD4+CD45RO+外周血百分比在AR組略低于Stable組，但無(wú)顯著差異；ROC曲線(xiàn)分析AUC=0.66（P>0.05）。CD4+CD45RO+pAR/CD4+CD45RO+AR外周血百分比在AR組顯著低于Sta

6、ble組；ROC曲線(xiàn)分析AUC=0.97（P<0.05）。
　　3）細(xì)胞因子分析：移植術(shù)后第2，4周，IL-2R在AR組較Stable組顯著升高：P<0.05。IL-2R、IL-6在移植術(shù)后第2周，線(xiàn)性回歸調(diào)整R^2值0.851，F(xiàn)檢驗(yàn)26.7，p<0.05。IL-2R、IL-6、IL-8在移植術(shù)后第4周，線(xiàn)性回歸調(diào)整R^2值0.95，F(xiàn)檢驗(yàn)941，p<0.05。
　　結(jié)論：
　　CD4+CD25+CD127low-T

7、reg外周血百分比在急性排斥反應(yīng)診斷前期具有“重要”的免疫預(yù)示及AR“預(yù)警”價(jià)值。CD4+CD25+CD127low-Treg外周血百分比在急性排斥反應(yīng)診斷期具有“極重要”的急性排斥反應(yīng)診斷價(jià)值。CD4+CD45RA+外周血百分比在急性排斥反應(yīng)診斷前期具有“重要”的免疫預(yù)示及“預(yù)警價(jià)值”。CD4+CD45RA+外周血百分比具有“重要”的急性排斥反應(yīng)診斷價(jià)值。CD4+CD45RO+外周血百分比在急性排斥反應(yīng)中具有“極重要”的免疫預(yù)示及“預(yù)

8、警”價(jià)值。外周血CD4+CD45RO+T淋巴細(xì)胞比值（CD4+CD45RO+pAR/CD4+CD45RO+AR）在無(wú)創(chuàng)監(jiān)測(cè)中具有“極重要”的急性排斥反應(yīng)診斷價(jià)值。細(xì)胞因子IL-2R敏感度較高，顯著升高與急性排斥具有高度相關(guān)性。聯(lián)合IL-2R、IL-6兩個(gè)變量，對(duì)AR具有“很高的預(yù)測(cè)價(jià)值”。聯(lián)合IL-2R、IL-6、IL-8三個(gè)變量，對(duì)AR有“很高的診斷價(jià)值”及AR干預(yù)效果判斷價(jià)值。IL-10值的升高，對(duì)于啟動(dòng)聯(lián)合評(píng)估具有重要免疫預(yù)示及“