槲皮素微納米載體的制備與評價.pdf

1、槲皮素是一種多羥基黃酮類化合物，廣泛存在于自然界各種植物體內(nèi)。研究證明槲皮素具有多種抗菌消炎、抗氧化、降血壓等生物活性，它最顯著的特點(diǎn)是抗氧化性強(qiáng)。雖然槲皮素具有廣譜的生物功能活性，但是由于其水溶性差、遇光熱等外界因素不穩(wěn)定，使其在功能食品等領(lǐng)域的應(yīng)用受到了極大地限制。本文分別制備了三種負(fù)載槲皮素的微納米載體體系，以提高其生物利用率。本研究主要內(nèi)容包括：
　?、磐ㄟ^脂質(zhì)篩選和乳化劑篩選，選擇GMS/GML/ODO(6∶9∶10)作

2、為納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的脂質(zhì)組分，Tween-20/PGFE-6/SE-11作為乳化劑組分。利用高壓均質(zhì)法對槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體進(jìn)行了制備。通過單因素考察法，得到工藝參數(shù):高剪切轉(zhuǎn)速10000 rpm，剪切時間30s，制備溫70℃，均質(zhì)壓力600 bar，均質(zhì)循環(huán)次數(shù)3次。Tween-20/PGFE-6/SE-11體系粒徑為105 nm, PDI為0.243，zeta電位為-31.9 mV，包封率為94.9％。物理穩(wěn)定性考察表明該體系均具

3、有良好的穩(wěn)定性。利用不同的生物凍干劑對凍干工藝進(jìn)行了考察。紅外光譜和X射線衍射分析證明了槲皮素是以無定形狀態(tài)被包裹在脂質(zhì)納米粒中。體外釋放實(shí)驗(yàn)中，槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在模擬腸胃液中釋放量很低，這說明脂質(zhì)納米粒可以有效保護(hù)槲皮素，最終以載體形式被機(jī)體吸收。體外模擬消化實(shí)驗(yàn)說明槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體可以提高活性物質(zhì)槲皮素的生物利用率。DPPH自由基清除試驗(yàn)說明槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體具有良好的抗氧化能力。細(xì)胞毒性試驗(yàn)證明該槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)

4、載體體系中槲皮素的濃度在0.5μ/mL以下時，體系是沒有明顯毒性的。此外，槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在流體飲料中保持了良好的穩(wěn)定性。
　　⑵在前面章節(jié)脂質(zhì)和乳化劑篩選的基礎(chǔ)上，固定脂質(zhì)組合GMS/GML/ODO(6∶9∶10)為納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的脂質(zhì)組分，選擇PGFE-10/PGFE-6/SE-11作為體系的乳化劑，利用單一因素考察法對高壓均質(zhì)工藝參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化。所得體系的粒徑124 nm，PDI為0.221，zeta電位為-35.5

5、 mV，包封率為93.50±0.35％。所得體系具有良好的物理穩(wěn)定性。凍干工藝結(jié)果表明，當(dāng)葡萄糖作為凍干保護(hù)劑時，樣品的凍干效果最佳。紅外光譜和拉曼光譜實(shí)驗(yàn)表明槲皮素已經(jīng)被包裹在脂質(zhì)納米粒中。槲皮素脂質(zhì)納米粒相對于游離的槲皮素具有緩釋作用，同時槲皮素脂質(zhì)納米粒在模擬胃液和模擬腸液中的釋放分別符合Higuch藥物釋放方程和Ritger-Peppas藥物釋放方程。體外模擬消化實(shí)驗(yàn)說明槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在模擬消化液中具有良好的穩(wěn)定性，可以

6、提高活性物質(zhì)槲皮素的生物利用率。DPPH自由基清除試驗(yàn)和超氧陰離子清除試驗(yàn)說明槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體具有良好的抗氧化活性。CCK-8細(xì)胞毒性試驗(yàn)證明，槲皮素本身對細(xì)胞沒有毒性，而超出一定濃度界限時的槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體對細(xì)胞是有毒性的，細(xì)胞核形態(tài)分析與細(xì)胞活力檢測結(jié)果是一致的。同時，該槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體體系與流體飲料具有很好的相容性。上述兩種槲皮素脂質(zhì)納米粒在功能食品領(lǐng)域已經(jīng)顯現(xiàn)出潛在的應(yīng)用價值，但是依然存在一些缺陷，比如體系含有

7、PEG、高溫不穩(wěn)定等。
　　⑶納米乳液是食品領(lǐng)域應(yīng)用特別廣泛的納米載體，本文最終利用高壓均質(zhì)法制備了槲皮素納米乳液。固定PGFE-10/PGFE-6/SE-11為乳化劑，通過單因素法，分別考察不同液態(tài)脂質(zhì)組成和含量、乳化劑含量以及均質(zhì)工藝參數(shù)對納米乳液性質(zhì)的影響，最后得到槲皮素納米乳液體系的組成成分和最佳工藝條件:液態(tài)脂質(zhì)ODO(10％)，PGFE-10/PGFE-6/SE-11乳化劑含量8％;制備溫度70℃，均質(zhì)壓力600 ba

8、r，均質(zhì)循環(huán)次數(shù)3次。槲皮素納米乳液體系的粒徑為147 nm，PDI為0.186，zeta電位為-49.7 mV，包封率為84.7±0.3％。所得槲皮素納米乳液體系具有良好的物理穩(wěn)定性。所得體系對流體飲料的品味和外觀沒有影響。槲皮素納米乳液在模擬胃液階段釋放較快，在模擬腸液階段呈現(xiàn)出緩釋的特點(diǎn)，此外，槲皮素納米乳液在模擬腸胃液中的全部釋放過程一級動力學(xué)藥物釋放方程。槲皮素納米乳液在體外模擬消化模型中表現(xiàn)出良好的性能，而且納米乳液相對于脂