槲皮素及其單糖苷異槲皮素，雙糖苷蘆丁抗自由基構(gòu)效關(guān)系研究.pdf

1、目的:采用不同氧自由基損傷模型對槲皮素(Quercetin，Q)及其單糖苷異槲皮素(Isoquercetin，I)和雙糖苷蘆丁(Rutin，R)的抗自由基作用進行比較性研究，進而對其構(gòu)效關(guān)系予以探討。 方法1.Q，I，R體外清除氧自由基作用采用H2O2/Fe2+體系，通過Fenton反應(yīng)生成羥自由基(·OH)；鄰苯三酚自氧化法，產(chǎn)生超氧陰離子(O2·-)；通過上述Fenton反應(yīng)生成·OH，進而造成小鼠肝勻漿細胞膜脂質(zhì)過氧化以及

2、紅細胞(RBC)液中RBC損傷性破裂。根據(jù)UV-754分光光度計所測光密度數(shù)值計算三種黃酮類藥物在四種不同濃度時的自由基清除率和抑制率，并根據(jù)清除率及抑制率計算各黃酮類化合物的SC50以及IC50。 2.Q，I，R對體外細胞自由基損傷模型的保護作用分別利用過氧化氫(H2O2)和缺氧缺糖培養(yǎng)液對人胚腎細胞(HEK293)造成損傷。采用MTT法，觀察不同處理后細胞存活率變化，測定細胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活力及細胞培養(yǎng)液上清乳酸

3、脫氫酶(LDH)含量，總抗氧化能力(TAC)，在細胞水平觀察三種化合物的清除自由基作用。 3.Q，I，R對腦、肝自由基損傷模型的保護作用通過雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎造成小鼠持久性腦缺血模型，應(yīng)用CCl4腹腔注射造成小鼠肝臟自由基損傷模型。測定小鼠腦勻漿SOD活力以及丙二醛(MDA)含量以及各組小鼠平均存活時間以觀察腦缺血對小鼠的損傷及三種化合物的保護作用。通過測定小鼠肝勻漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)以及MDA含量，觀察CCl4對小鼠肝臟的損害

4、以及三種化合物的保護作用。 結(jié)論1.三種黃酮類化合物均有極強的抗自由基活性；在體外純化學(xué)反應(yīng)體系(·OH實驗，O2·-實驗)中，R＞I＞Q；體外生物體系(小鼠肝勻漿膜脂質(zhì)過氧化損傷實驗，兔RBC膜破裂實驗)中，其順序正好相反，為Q＞I＞R。 2.三種黃酮類化合物對體外細胞培養(yǎng)中H2O2及缺氧缺糖產(chǎn)生的自由基有顯著清除作用，對損傷細胞具有保護作用。其作用強度為Q＞I＞R。 3.三種黃酮類化合物對腦缺血誘發(fā)小鼠腦自由