2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的:優(yōu)選二氫槲皮素的提取工藝,考察粉碎粒度對(duì)其提取率的影響并將其分離純化;通過氨基酸對(duì)二氫槲皮素結(jié)構(gòu)修飾以改善二氫槲皮素的水溶性,從而提高二氫槲皮素的生物活性。
  方法:(1)以落葉松為原料采用熱水回流提取法、乙醇回流提取法、微波輔助提取法、超聲輔助提取法、閃式提取法5種方法提取二氫槲皮素,采用響應(yīng)面法Box-Behnken設(shè)計(jì)優(yōu)化閃式提取法提取二氫槲皮素的工藝??疾觳煌鬯槎龋ㄟ^1-9號(hào)藥典篩)對(duì)二氫槲皮素提取率的影響并采用

2、有機(jī)試劑萃取,熱水重結(jié)晶的方法將其分離純化。(2)以二氫槲皮素和氨基酸(半胱氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、甘氨酸、賴氨酸)為原料,采用常規(guī)法合成二氫槲皮素-氨基酸席夫堿化合物,通過核磁共振碳譜、質(zhì)譜和紅外光譜對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征。并考察其水溶性和穩(wěn)定性。(3)通過體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)和體外抗氧化實(shí)驗(yàn)研究二氫槲皮素-氨基酸席夫堿的生物活性。
  結(jié)果:(1)5種提取方法的提取率分別為0.17%、0.20%、0.21%、0.22%、0.47

3、%,閃式提取法提取二氫槲皮素的提取率與其他4種方法比較有顯著差異。響應(yīng)面優(yōu)化閃式提取法的最優(yōu)條件確定為:提取時(shí)間79 s、乙醇濃度81%和料液比1:10在此條件下二氫槲皮素提取率可達(dá)0.47%。原料經(jīng)粉碎過篩后(1~9號(hào)藥典篩),二氫槲皮素的提取率分別為0.20%、0.21%、0.20%、0.43%、0.53%、0.36%、0.35%、0.33%、0.32%。其中5號(hào)篩的提取率明顯高于其他8個(gè)篩號(hào)。二氫槲皮素粗品經(jīng)有機(jī)試劑萃取,熱水重結(jié)

4、晶后純度達(dá)到98%。(2)合成得到并表征了6個(gè)二氫槲皮素-氨基酸席夫堿類化合物,分別為二氫槲皮素-半胱氨酸席夫堿鈉鹽(化合物I)、二氫槲皮素-丙氨酸席夫堿鈉鹽(化合物II)、二氫槲皮素-苯丙氨酸席夫堿鈉鹽(化合物III)、二氫槲皮素-谷氨酸席夫堿鈉鹽(化合物IV)、二氫槲皮素-甘氨酸席夫堿鈉鹽(化合物V)、二氫槲皮素-賴氨酸席夫堿鈉鹽(化合物VI)。改善了母體化合物的水溶性,通過對(duì)化合物的熔點(diǎn)測(cè)定發(fā)現(xiàn)化合物II,III的熱穩(wěn)定性比二氫槲

5、皮素好,化合物I,V,VI熱穩(wěn)定性幾乎沒有改變,化合物IV熱穩(wěn)定性降低。通過酸堿穩(wěn)定性考察pH值3~8范圍內(nèi)化合物I~VI均有較好的穩(wěn)定性。(3)抗氧化實(shí)驗(yàn)表明,二氫槲皮素和目標(biāo)化合物I~VI對(duì)自由基清除作用隨著濃度的升高而增強(qiáng),呈正相關(guān)。化合物I~VI的DPPH自由基的清除作用結(jié)果為79.54%、64.63%、64.68%、65.28%、76.73%和65.15%,二氫槲皮素的清除率為62.83%。化合物I~VI對(duì)超氧陰離子的清除作用

6、結(jié)果為59.54%、48.72%、50.37%、48.72%、50.53%和54.87%。二氫槲皮素的清除率為60.72%。化合物I~VI對(duì)清除羥基自由基作用結(jié)果為48.25%、49.42%、46.65%、45.93%、47.53%、45.46%。二氫槲皮素的清除率為53.77%。體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)表明,目標(biāo)化合物I~VI作用于人乳腺癌細(xì)胞MCF-7及人宮頸癌Hela細(xì)胞的抑制率與二氫槲皮素相比,都有一定程度的提高?;衔颕~VI作用于人乳

7、腺癌細(xì)胞MFC-7,24 h后的抑制率結(jié)果分別為71.2%,46.9%,48.7%,59.4%,68.3%,54.6%;二氫槲皮素作用于人乳腺癌細(xì)胞MFC-7的抑制率為38.8%?;衔颕~VI作用于宮頸癌Hela細(xì)胞24 h后的抑制率結(jié)果分別為66.9%,41.4%,45.1%,58.2%,61.7%,51.9%;二氫槲皮素作用于人宮頸癌Hela細(xì)胞的抑制率為39.6%。
  結(jié)論:本文通過5種方法從落葉松中提取二氫槲皮素確定最

8、佳提取工藝,并考察了粉碎粒度對(duì)其提取率的影響,最大化提取二氫槲皮素。合成得到并表征了6個(gè)二氫槲皮素-氨基酸席夫堿化合物,其水溶性與母體相比有所提高?;衔颕I,III的熱穩(wěn)定性比二氫槲皮素好,化合物I,V,VI熱穩(wěn)定性幾乎沒有改變。化合物IV熱穩(wěn)定性有所降低。在pH值3~8范圍內(nèi)化合物I~VI有較好的穩(wěn)定性。對(duì)新合成的二氫槲皮素-氨基酸席夫堿化合物及相應(yīng)的母體黃酮類化合物進(jìn)行體外抗氧化,抗腫瘤活性研究,目標(biāo)化合物I~VI都有一定程度的抗

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