血清RhoA與2型糖尿病及其血管并發(fā)癥的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：2型糖尿病(type2 diabetes mellitus，T2DM)是一組既存在胰島素分泌缺陷又存在胰島素抵抗，以慢性高血糖為特征的代謝性疾病，由遺傳因素和環(huán)境因素長期共同作用所造成。隨著病情進(jìn)展，糖尿病多種慢性并發(fā)癥相繼出現(xiàn)，其中血管并發(fā)癥已成為糖尿病患者致殘致死的主要原因。糖尿病血管并發(fā)癥包括大血管并發(fā)癥和微血管并發(fā)癥，大血管并發(fā)癥主要表現(xiàn)為心、腦、下肢血管的動脈粥樣硬化，微血管并發(fā)癥主要表現(xiàn)為糖尿病腎病和視網(wǎng)膜病變。目前糖

2、尿病血管并發(fā)癥發(fā)生的病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全明了。近來RhoA/ROCK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與糖尿病的研究備受廣大學(xué)者的重視，RhoA是小G蛋白Rho家族的重要成員之一，在細(xì)胞內(nèi)起分子開關(guān)作用，與其下游靶蛋白Rho激酶(Rho-associated kinases，ROCK)結(jié)合后在細(xì)胞的許多基礎(chǔ)生命活動及病理生理過程中起重要作用。許多臨床研究表明當(dāng)血管壁細(xì)胞受到高血糖、高血脂、生長因子或細(xì)胞因子等細(xì)胞外有害刺激時，信號在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)小G蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)，引

3、起血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞功能、形態(tài)、表型和基因表達(dá)等改變，參與T2DM的以及T2DM血管并發(fā)癥的發(fā)生。但目前國內(nèi)外對糖尿病患者血清RhoA水平的研究甚少。本研究運(yùn)用酶聯(lián)免疫技術(shù)，比較健康人群、單純糖尿病患者及糖尿病血管并發(fā)癥患者之間血清RhoA水平的變化，探討其在糖尿病及糖尿病血管并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制。
　　方法：根據(jù)1999年WHO對糖尿病診斷及分型標(biāo)準(zhǔn)隨機(jī)選擇T2DM患者共120例。根據(jù)有無并發(fā)癥及其種類分為單

4、純T2DM組40例、T2DM微血管并發(fā)癥組40例和T2DM大血管并發(fā)癥組40例；正常對照組為同期在我院體檢的人群中選擇的健康個體40名。受試者過夜禁食12小時，晨起空腹抽取肘靜脈血5 ml，常規(guī)分離血清，于-80℃保存待測。
　　1.RhoA的測定：采用ELISA法。
　　2.臨床及生化指標(biāo)的測定：①血糖、血脂、肝腎功能用全自動生化分析儀測定；②糖化血紅蛋白和尿A/Cr由德國拜耳DCA2000+儀器測定；
　?、垡葝u素

5、由放免法測定，計算胰島素抵抗指數(shù)HOMA-IR=ln(FINS×FPG/22.5)，胰島素敏感指數(shù)ISI=-ln(FINS×FPG)；④測量身高、體重，并計算體重指數(shù)(BMI)=體重/身高2。
　　3.統(tǒng)計學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)輸入計算機(jī)，用SPSS13.0軟件處理。各組數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性及方差齊性檢驗，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X-±s)表示，不符合正態(tài)分布的計量資料用中位數(shù)(百分位間距)表示。TG、FINS呈非正態(tài)分布，經(jīng)取自然對數(shù)后進(jìn)行

6、統(tǒng)計處理；組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q檢驗；RhoA與各因素相關(guān)性研究中，應(yīng)用pearson或Spearman相關(guān)分析。RhoA及其他各研究因素參與2型糖尿病及其血管并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的危險性采用Logistic多元逐步回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.正常對照組、單純T2DM組和T2DM血管并發(fā)癥組三組之間年齡、性別構(gòu)成比無顯著差異，單純T2DM組和T2DM血管并發(fā)癥組之間病

7、程無顯著差異(P＞0.05)，具有可比性。
　　2.單純T2DM組BMI顯著高于正常對照組，T2DM血管并發(fā)癥組BMI顯著高于正常對照組和單純T2DM組(均P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3.單純T2DM組FPG、TC、TG、LDL-C均顯著高于正常對照組(均P＜0.05)，T2DM血管并發(fā)癥組上述指標(biāo)及HbAlc、FINS、HOMA-IR均顯著高于單純T2DM組，HDL-C、ISI則呈相反變化(均P＜0.05)，差

8、異均有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4.單純T2DM組血清RhoA水平為9.91±3.41 ng/ml，顯著高于正常對照組的4.77±1.92 ng/ml(P＜0.05)，T2DM血管并發(fā)癥組RhoA水平更高，為21.27±7.00 ng/ml，顯著高于正常對照組和單純T2DM組(P＜0.05)。
　　5.T2DM大血管并發(fā)癥組血清RhoA水平為25.16±5.46 ng/ml，顯著高于T2DM微血管并發(fā)癥組的14.43±3.92 ng

9、/ml(P＜0.05)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　6.血清RhoA與BMI、TC、LDL-C、FPG、HbAlC、FINS、HOMA-IR呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別0.24、0.41、0.50、0.47、0.35、0.36、0.66；與HDL-C、ISI呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.41、-0.92(均P＜0.01)，有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　7.T2DM的危險因素多元Logistic回歸分析顯示，RhoA、BMI、TC、LDL-C、

10、TG是T2DM發(fā)生發(fā)展的危險因素。
　　8.T2DM血管并發(fā)癥組的危險因素多元Logistic回歸分析顯示，RhoA、HbAlc、TC、LDL-C是血管病變發(fā)生發(fā)展的危險因素。
　　結(jié)論：
　　1.T2DM患者血清RhoA水平升高，合并血管并發(fā)癥患者水平更高，說明血清RhoA升高是糖尿病及其血管并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的獨(dú)立危險因素，有可能成為預(yù)測糖尿病及其血管并發(fā)癥發(fā)生的指標(biāo)之一，并提供治療的新靶點(diǎn)。
　　2.T2DM大