2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、洳≥：J～曾’碩士學(xué)位論文⑧、P77634；家蠶SCISB基因克隆及其原核表達(dá)的研究作者姓名：韭堇指導(dǎo)教師：韭攫潮數(shù)援專(zhuān)業(yè)學(xué)科：生塑焦堂生僉壬生絲堂所在學(xué)院：生僉盤(pán)堂堂瞳提交日期：三鐾墨五生五月浙江大學(xué)中國(guó)杭州浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要根據(jù)NCBI已經(jīng)報(bào)道的SCISB的mRNA序列，自行設(shè)計(jì)一對(duì)特異性引物，利用RTPCR擴(kuò)增獲得SCISB的cDNA片段，將該片段連接到原核表達(dá)載體pGEX4T1中，經(jīng)PCR、酶切鑒定以及測(cè)序分析，證實(shí)成

2、功構(gòu)建了重組表達(dá)載體pGEX4T1一SCI—SB。用已構(gòu)建的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)，挑取陽(yáng)性克隆培養(yǎng)，IPTG誘導(dǎo)后裂解菌作SDS—PAGE分析，在34kD處有一特異性蛋白條帶，與預(yù)期值相符。表達(dá)量可達(dá)菌體總蛋白的15％左右。融合蛋白以包涵體的形式存在，超聲波裂解菌體分離包涵體并離心、洗滌；用20％Sarkosyl(十二烷基肌氨酸鈉)溶解包涵體，采用親和層析純化了融合蛋白GSTSCISB。胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶活性抑

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