天麻醇提物對灰樹花深層發(fā)酵代謝影響及其機制研究.pdf

1、本論文是關(guān)于天麻醇提物對灰樹花深層發(fā)酵代謝影響及其機制的研究。主要研究內(nèi)容包括天麻醇提物對灰樹花發(fā)酵的影響，天麻醇提物各成分在灰樹花發(fā)酵過程中的轉(zhuǎn)化，對羥基苯甲醇對灰樹花產(chǎn)胞外多糖的影響及其發(fā)酵動力學(xué)，灰樹花發(fā)酵過程中葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的初步研究。
　　研究和建立了天麻素、對羥基苯甲醇、對羥基苯甲醛和巴利森甙定性和定量的檢測方法，并分析了高壓滅菌前后天麻醇提液主要成分的變化，天麻醇提液經(jīng)過高壓滅菌后的天麻素含量為14.6955 mg/

2、g、對羥基苯甲醇含量為1.0857 mg/g、對羥基苯甲醛含量為1.9753mg/g、巴利森甙含量為2.0571 mg/g。
　　研究了不同濃度的天麻醇提液對灰樹花菌絲體生長和胞外多糖合成的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：當添加量在7％(v/v)時（100 mL發(fā)酵液體系中添加7 mL的天麻醇提液），相當于100 mL發(fā)酵體系中約含有0.7 g天麻，此時灰樹花菌絲體和胞外多糖（EPS）的產(chǎn)量達到最大，分別為3.35±0.09 g/L和444.24

3、±17.76 mg/L。
　　試驗和評價了天麻醇提物中各單一成分對灰樹花菌絲體生長和胞外多糖合成的影響，添加依據(jù)為天麻醇提液添加量在7%(v/v)時所含有的各單一成分的含量。分別添加：Ⅰ天麻醇提物(7 g/L)、Ⅱ天麻素(103 mg/L)、Ⅲ對羥基苯甲醇(7.6 mg/L)、Ⅳ對羥基苯甲醛(13.8 mg/L)以及Ⅴ三種等質(zhì)量的單一成分組合添加。結(jié)果表明：這五組實驗相比于空白組（未添加）均能一定程度促進灰樹花菌體生長和胞外多糖的

4、生物合成，其中第Ⅰ組和第Ⅴ組促進灰樹花菌絲體生長和胞外多糖合成的效果基本一樣且為最佳。第Ⅱ組次之。第Ⅲ組和第Ⅳ組不是很明顯，然而通過計算灰樹花胞外多糖生產(chǎn)率發(fā)現(xiàn)對羥基苯甲醛和對羥基苯甲醇相比于其他組更能提高菌絲體產(chǎn)胞外多糖的能力。
　　試驗和分析了天麻醇提液中各成分在灰樹花發(fā)酵過程中含量的變化，每100 mL發(fā)酵液中天麻素從10.28 mg降到5.36 mg，降低了47.86%；對羥基苯甲醇從0.76 mg降到0.67 mg，下降

5、了11.84%；對羥基苯甲醛從1.38 mg降到0.35 mg，下降了74.64%；而只有巴利森甙含量增加了，從1.44 mg升到了3.76 mg，提高了161.11%。并采用靜息細胞轉(zhuǎn)化實驗來進一步揭示，灰樹花發(fā)酵可以將對羥基苯甲醇和對羥基苯甲醛轉(zhuǎn)化合成天麻素，可能的途徑是對羥基苯甲醇在灰樹花菌絲體懸浮液中被糖基化而合成天麻素，而對羥基苯甲醛在灰樹花菌絲體懸浮液中先被還原成對羥基苯甲醇，然后再少量合成了天麻素。
　　研究了對羥基

6、苯甲醇對灰樹花胞外多糖合成的影響。對羥基苯甲醇添加量為200 mg/L時對灰樹花菌體生物量和胞外多糖合成的促進作用效果最明顯，與空白組（未添加對羥基苯甲醇）分別提高了22.73%和10.24%。此外還進行了添加對羥基苯甲醇后灰樹花發(fā)酵動力學(xué)研究，考察了發(fā)酵過程中菌絲量、殘?zhí)牵ㄟ€原糖）、胞外多糖、pH值、對羥基苯甲醇和天麻素含量的變化。
　　研究了灰樹花發(fā)酵工程中葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的調(diào)控機制。葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶最適反應(yīng)溫度為50℃，而其熱穩(wěn)