粗壯脈紋孢菌發(fā)酵豆渣生產(chǎn)低聚糖的研究.pdf

1、本文以豆制品加工副產(chǎn)物——豆渣為原料，利用本實驗室從江西傳統(tǒng)發(fā)酵食品中篩選分離得到的具有高產(chǎn)纖維素酶和β-胡蘿卜素能力的菌株——粗壯脈紋孢菌（Neurospora crassa）對其進行發(fā)酵，分析探討發(fā)酵過程中營養(yǎng)成分的變化規(guī)律。并以發(fā)酵后豆渣中的低聚糖為對象，研究了發(fā)酵豆渣中低聚糖的最佳提取工藝條件、低聚糖的分離純化工藝及低聚糖的組成;并利用體外發(fā)酵技術評價了發(fā)酵豆渣中低聚糖的功能性，以便為低聚糖的進一步開發(fā)利用提供科學支持。得到的主

2、要結果如下:
　　 1、Neurospora crassa發(fā)酵豆渣過程中，隨著發(fā)酵時間的延長，豆渣培養(yǎng)基的回收率逐漸下降，至48 h之后趨于穩(wěn)定;粗纖維降解率和粗蛋白質含量呈上升趨勢，且在發(fā)酵40-48 h之后保持恒定;粗脂肪和類胡蘿卜素含量則先呈上升趨勢，增加至峰值后又逐漸下降，但粗脂肪在下降到一定程度后趨于穩(wěn)定;可溶性總糖含量隨著發(fā)酵時間的延長而上升，至峰值時又緩慢下降，之后又回升并在48 h后趨于穩(wěn)定。
　　 2、

3、經(jīng)過單因素實驗和正交實驗優(yōu)化發(fā)酵豆渣中低聚糖的提取工藝，得到最優(yōu)提取工藝條件為:料液比1∶25，提取時間為90 min，提取溫度為70℃，乙醇濃度為50％，提取2次。在此最優(yōu)提取工藝條件下，發(fā)酵豆渣中低聚糖得率為11.91％。
　　 3、采用Sevag法除蛋白，AB-8大孔樹脂動態(tài)吸附脫色，對低聚糖粗提液進行純化處理。結果表明:蛋白質去除率達67.21％，脫色率62.41％，低聚糖保留率分別為95.98％和91.22％，這兩種方

4、法能夠很好的純化低聚糖。純化后的低聚糖經(jīng)高效液相色譜技術分離，得到2個分離組分（組分A和組分B）;通過HPLC-ESI-MS和紅外吸收光譜等技術的進一步分析，組分B具有m/z341去質子準分子離子峰，這是一個二糖分子去掉一個質子得到的;紅外吸收光譜分析其具有糖類化合物的特征吸收峰，其中874.6 cm-1是吡喃型β-型C-H變角振動的特征吸收峰，因此可以確定組分B為纖維二糖。
　　 4、將分離純化后的低聚糖樣品進行體外發(fā)酵實驗，

5、研究其體外發(fā)酵特性。實驗發(fā)現(xiàn):800 mg/L低聚糖組具有良好的發(fā)酵特性，產(chǎn)氣量(7.25±0.16 mL)顯著低于對照組(7.98±0.42 mL)(P＜0.05)，顯著高于葡萄糖組(6.49±0.44 mL)(P＜0.05);部分低聚糖組發(fā)酵液pH(4.95-5.00)顯著低于對照組(5.03±0.03)(P＜0.05)，800 mg/L低聚糖組最低pH為4.95;隨著低聚糖質量濃度的增加，發(fā)酵液NH3-N含量呈下降趨勢，且在1g/