版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)簡稱紅斑狼瘡,是由多克隆自身反應(yīng)性物B細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病,其直接的致病因子是多克隆自身抗體,并以免疫復(fù)合物的形式造成多種組織器官損傷。對于引起SLE的確切病因仍然不很明確,但是自身抗體對SLE的發(fā)病起到了很重要的作用已是共識。目前臨床上治療SLE最常用的措施是使用非特異性免疫抑制劑、細(xì)胞毒藥物和激素,盡管這些藥物能有效地抑制免疫活性細(xì)胞,控制疾病病程
2、,但毒副作用比較明顯,另一方面由于用藥后自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞持續(xù)存在,因此很難達(dá)到治愈的目的。近年來針對分化為漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞治療紅斑狼瘡雖然取得了很大進(jìn)展,但是此策略因?yàn)椴荒苡行宄凉{細(xì)胞,體內(nèi)長壽漿細(xì)胞依然分泌自身抗體,這些抗體可再次激活病理性免疫應(yīng)答反應(yīng),進(jìn)而導(dǎo)致SLE患者復(fù)發(fā),所以尋求針對分泌抗體的漿細(xì)胞的新靶標(biāo)成為核心問題。
目的:
本研究旨在探索重慶地區(qū)活動性系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者,外周血促B淋巴細(xì)胞
3、成熟蛋白1(Blimpl/PRDMl)、B淋巴細(xì)胞成熟抗原(BCDA)表達(dá)和CD138+漿細(xì)胞數(shù)量和健康人之間的是否存在差異,揭示PRDM1、BCDA表達(dá)與CD138+漿細(xì)胞數(shù)量之間的關(guān)系。同時通過紅斑狼瘡動物模型和正常動物對比,了解Blimp1在動物不同組織的表達(dá)情況,以及揭示Blimp1與紅斑狼瘡之間的關(guān)系。本研究的開展將明確Blimp1可否成為以漿細(xì)胞為靶細(xì)胞治療紅斑狼瘡,為進(jìn)一步開發(fā)治療紅斑狼瘡的新藥奠定基礎(chǔ),還可以為治療其他漿
4、細(xì)胞相關(guān)疾病的藥物設(shè)計(jì)提供新的策略
方法
1.收集40例SLE患者血液標(biāo)本為實(shí)驗(yàn)組,30例健康體檢血液標(biāo)本為對照組。提取外周血單個核細(xì)胞總RNA、逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA,再進(jìn)行熒光定量PCR(FQ-PCR),根據(jù)相對定量法計(jì)算PRDM1、BCMAmRNA相對表達(dá)情況。
2.收集40例SLE患者血液標(biāo)本為實(shí)驗(yàn)組,30例健康體檢血液標(biāo)本為對照組。Ficoll梯度離心收集外周血單個核細(xì)胞,按照CD38-FITC,CD
5、56-PE,CD45-PC5;CD19-FITC,CD138-PE,CD45-PC5;IgG1-PE/IgG1-FITC/IgG1-PC5,CD45-PC5三組標(biāo)記細(xì)胞,流式細(xì)胞技術(shù)研究CD138+漿細(xì)胞量的差異。
3.紅斑狼瘡模型小鼠和正常對照小鼠在16周齡時乙醚麻醉處死,取腎臟、脾臟及淋巴結(jié)組織,行免疫組化、免疫印跡、HE染色,觀察Blimpl蛋白表達(dá)以及病理變化。提取上述組織總RNA,行RT-PCR和電泳,測量Blimp
6、1凝膠光密度OD值,計(jì)算模型小鼠和正常小鼠Blimpl mRNA表達(dá)相對倍數(shù)。
結(jié)果
1.經(jīng)過SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件t檢驗(yàn)計(jì)算得出SLE實(shí)驗(yàn)組PRDM1和BCMA的△ct值和體檢對照組的△ct值有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組PRDM1△ct為0.67,BCMA△ct為0.81;對照組PRDM1△ct是1.74,BCMA△ct為1.72。通過相對定量2-△△ct法計(jì)算,得到SLE實(shí)驗(yàn)組的PRDM1 mRNA
7、的含量是體檢對照組的2.09倍,SLE實(shí)驗(yàn)組的BCMA mRNA的含量是體檢對照組的1.87倍。
2.用流式細(xì)胞技術(shù)分析,結(jié)果提示SLE患者和健康對照者外周血CD138+漿細(xì)胞數(shù)量差異明顯。
3.經(jīng)Imagepro-Plus6.0軟件檢測免疫組化(IHC)光密度OD值,結(jié)果顯示Blimpl蛋白在SLE模型小鼠的腎臟、脾臟及淋巴結(jié)組織內(nèi)表達(dá)明顯高于正常小鼠,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均小于0.05)。其結(jié)果顯示Blimpl蛋白
8、在SLE模型小鼠的腎臟、淋巴結(jié)及脾臟組織表達(dá)分別是正常小鼠的1.57、1.86、2.00倍。經(jīng)quantity one軟件分析Western Blot,PCR產(chǎn)物電泳凝膠的光密度OD值(P均小于0.05),Western Blot果結(jié)顯示Blimpl蛋白在SLE模型小鼠的腎臟、淋巴結(jié)及脾臟組織表達(dá)分別是正常小鼠的1.54、1.99、2.21倍;Blimpl mRN,A在SLE模型小鼠的腎臟、淋巴結(jié)及脾臟組織表達(dá)分別是正常小鼠的1.76、
9、2.02、2.05倍。HE染色結(jié)果顯示腎臟間質(zhì)內(nèi)有少量炎細(xì)胞浸潤,局灶性漿細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及少量巨噬細(xì)胞浸潤。偶見腎小球內(nèi)細(xì)胞數(shù)增多,基底膜略增厚。淋巴結(jié)淋巴濾泡增生,生發(fā)中心擴(kuò)大。脾臟脾小體明、暗區(qū)結(jié)構(gòu)正常,偶見紅髓中多核巨細(xì)胞增生明顯,小動脈周增生及出現(xiàn)少量漿細(xì)胞。
結(jié)論:
1.證實(shí)在SLE患者外周血PRDM1和BCMA mRNA高表達(dá),CD138+漿細(xì)胞數(shù)量的增多與PRDM和BCMA高表達(dá)相關(guān)。PRDM1和BCM
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 抑制轉(zhuǎn)錄因子Blimp1在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的作用及機(jī)制研究.pdf
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡中Blimp1的表達(dá)及其對BCMA的調(diào)控研究.pdf
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡
- 系統(tǒng)性系統(tǒng)性紅斑狼瘡
- 轉(zhuǎn)錄因子RFX1在系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病中的作用研究.pdf
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡內(nèi)科
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡病因
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡教學(xué)
- sle系統(tǒng)性紅斑狼瘡
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡血漿microRNA的表達(dá)及意義.pdf
- 修改系統(tǒng)性紅斑狼瘡
- cpc系統(tǒng)性紅斑狼瘡
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡sle
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡講稿
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡護(hù)理
- 人纖維介素在系統(tǒng)性紅斑狼瘡及深部紅斑狼瘡患者中的表達(dá)及意義.pdf
- CD200在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的表達(dá)及意義.pdf
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷
- 系統(tǒng)性紅斑狼瘡護(hù)理常規(guī)
評論
0/150
提交評論