心功能自然衰退過(guò)程中線粒體PT孔對(duì)線粒體呼吸功能的影響及機(jī)制研究.pdf

1、　　目的：研究隨年齡增長(zhǎng)線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔開(kāi)放改變與線粒體呼吸功能的改變的關(guān)系及其可能的潛在機(jī)制。
　　方法：密度梯度離心分離心肌線粒體；用氧電極法檢測(cè)線粒體呼吸功能；分光光度法檢測(cè)MPTP開(kāi)放；采用酶解法分離大鼠心肌細(xì)胞,并用熒光顯微鏡法檢測(cè)線粒體膜電位；紫外分光光度法檢測(cè)各線粒體呼吸復(fù)合體的活性；蛋白免疫印跡法檢測(cè)MPTP蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：從電鏡圖中可見(jiàn)衰老大鼠心肌線粒體形態(tài)發(fā)生了明顯改變,表現(xiàn)為外膜破裂,內(nèi)

2、脊斷裂,線粒體內(nèi)部形成空泡；線粒體呼吸功能也隨年齡的增長(zhǎng)而下降,與3月齡組相比,15月齡組開(kāi)始出現(xiàn)顯著性變化(p<0.05),這種變化隨年齡增長(zhǎng)更加明顯(p<0.01)；MPTP開(kāi)放能夠?qū)е戮€粒體呼吸功能的下降(p<0.05),而抑制呼吸功能不能引起MPTP的開(kāi)放(p>0.05)；進(jìn)一步探尋MMP在兩者之間的作用可以發(fā)現(xiàn), MPTP開(kāi)放能夠引起MMP的降低(p<0.05),MMP的下降雖然不影響線粒體的氧化水平(p>0.05),但可以通

3、過(guò)解耦連而抑制ADP磷酸化過(guò)程；而抑制線粒體呼吸功能不能引起MMP下降(p>0.05),且MMP下降也不能導(dǎo)致MPTP開(kāi)放(p>0.05)；對(duì)于MPTP調(diào)節(jié)線粒體呼吸功能的機(jī)制的進(jìn)一步探究發(fā)現(xiàn),MPTP開(kāi)放沒(méi)有抑制線粒體呼電子傳遞鏈的功能(p>0.05),但是使老年大鼠的腺苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)體ANT1表達(dá)增強(qiáng),ANT2表達(dá)減少。CyP-D的表達(dá)顯著增強(qiáng)(p<0.05)。
　　結(jié)論：隨年齡增長(zhǎng)線粒體PT開(kāi)放增強(qiáng)可通過(guò)降低線粒體膜電位抑制線