高產(chǎn)酸型乳酸桿菌的篩選.pdf

1、乳酸菌在食品行業(yè)中有著重要的應(yīng)用，在乳酸菌發(fā)酵食品和工業(yè)乳酸的生產(chǎn)等方面有著重要的作用。在酸乳生產(chǎn)上，高產(chǎn)酸菌可降低凝乳時間，使乳制品發(fā)酵周期縮短；在工業(yè)乳酸生產(chǎn)上，乳酸菌也是生物發(fā)酵法生產(chǎn)乳酸的主要菌種，可以提高乳酸的產(chǎn)量。大多數(shù)產(chǎn)酸性能高的菌種恰恰是乳酸桿菌。因此篩選高產(chǎn)酸型的乳酸菌具有重要的現(xiàn)實意義。
　　 本課題以農(nóng)家酸菜的發(fā)酵液為研究對象，采用平板法，分離純化發(fā)酵液中的原始菌株并從中篩選其首要特性產(chǎn)酸性能強的乳酸桿菌菌

2、株。從而可以使其可以用于發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)之中，并對陜西周邊酸菜發(fā)酵液中的主要菌群有了初步了解。
　　 首先從陜西周邊縣區(qū)采集原始的酸菜發(fā)酵液，經(jīng)過初步的分離純化，運用CaCO3MRS瓊脂平板選取透明圈較大的菌群，挑取放入?yún)捬豕苤羞M行傳代培養(yǎng)。最終得到12株生命力旺盛，溶鈣圈大的菌株，初步判斷其產(chǎn)酸能力高于其它菌株。通過鏡檢發(fā)現(xiàn)其菌體呈現(xiàn)桿狀，菌落呈淡黃色或白色。采用薄層色譜分析方法，發(fā)現(xiàn)供試菌株均能產(chǎn)生乳酸，初步判定其為乳酸桿菌。<

3、br>　　 對供試菌株進行生理生化研究，采用法國梅里埃公司的API50CHL生物試劑盒鑒定其菌種屬性，發(fā)現(xiàn)12株菌均屬于乳酸菌屬。鑒定結(jié)果如下：戶縣地區(qū)四株菌(h1、h2、h3、h4):h1--Lactobacillus fermentum(發(fā)酵乳桿菌)、h2--Lactobacillus fermentum(發(fā)酵乳桿菌)、h3--Lactobacilluscellobiosus(纖維二糖乳桿菌)、h4--Lactobacillus

4、brevis(短乳桿菌)；長安區(qū)四株菌(c1、c2、c3、c4):c1--Lactobacillus fermentum（發(fā)酵乳桿菌）、c2--Lactobacillus plantarum(植物乳桿菌)、c3--Lactobacillus plantarum(植物乳桿菌)、c4--Lactobacillus plantarum(植物乳桿菌)；周至縣地區(qū)四株菌(z1、z2、z3、z4)：z1--Lactobacillus pentosu

5、s(戊糖乳桿菌)、z2--Lactobacillussalivarilus(唾液乳桿菌)、z3--Lactobacillus plantarum(植物乳桿菌)、z4--Lactobacillus plantarum(植物乳桿菌)。
　　 對十二株菌進行MRS培養(yǎng)基中的產(chǎn)酸性能研究。供試菌株的產(chǎn)酸狀況如下：戶地區(qū)四株菌(h1、h2、h3、h4)的產(chǎn)酸依次為：2.64％、2.84％、1.79％、2.65％。長安區(qū)四株菌(c1、c2、

6、c3、c4)的產(chǎn)酸依次為：2.12％、1.63％、1.91％、2.28％。周至縣地區(qū)四株菌(z1、z2、z3、z4)的產(chǎn)酸依次為：2.02％、2.20％、2.10％、1.80％。
　　 對十二株菌進行發(fā)酵乳實驗測定其產(chǎn)酸性能。在48h時測得：戶地區(qū)四株菌(h1、h2、h3、h4)的產(chǎn)酸依次為：168°T、195°T、148°T、165°T;長安區(qū)四株菌(c1、c2、c3、c4)的產(chǎn)酸依次為：163°T、146°T、166°T、1

7、75°T;周至縣地區(qū)四株菌(z1、z2、z3、z4)的產(chǎn)酸依次為：130°T、150°T、135°T、120°T。
　　 經(jīng)比較最終選擇出三株產(chǎn)酸能力強的菌株。它們分別是：戶縣地區(qū)的菌株h2、長安區(qū)的菌株c4、周至地區(qū)的菌株z2。將此三株菌接種于MRS培養(yǎng)基中發(fā)酵48h后測得三株菌株h2、c4、z2的總酸為：2.8g乳酸/100ml、2.3g乳酸/100ml、2.21g乳酸/100ml。三株菌株的活菌分別為：1.17×109個/

8、ml、1.01×109個/ml、8.91×108個/ml。
　　 最后將三株菌菌株接種于滅菌牛乳中做發(fā)酵乳試驗，三株菌株h2、c4、z2凝乳時間分別為：5h30min、5h50min、6h10min;凝乳時的酸度分別為：65.5°T、61.3°T、57.5°T。
　　 因此可以看出菌株h2在MRS培養(yǎng)基和牛乳中的產(chǎn)酸性能最好，產(chǎn)酸速度最快。其產(chǎn)酸量可達2.8g乳酸/100ml，活菌數(shù)菌數(shù)可達到1.17×109個/ml的高