不同劑型雙歧桿菌制劑的制備技術(shù)及存活性能的研究.pdf

1、本文主要內(nèi)容和結(jié)果如下： 1．采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，得出制造雙歧桿菌生長所需厭氧環(huán)境的試劑配方：在1L的密閉容器中，次亞硫酸鈉3.0g，碳酸氫鈉3.0g，還原鐵粉0.5g，水0.4mL，可獲得較為良好的厭氧效果。 2．經(jīng)篩選確定了雙歧桿菌生長情況較好的基礎(chǔ)培養(yǎng)基為TPY液體培養(yǎng)基。采用單因素和正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，得到最佳培養(yǎng)基配方：在TPY液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，水解酪蛋白1％，大豆蛋白0.5％，酵母粉0.3％，水蘇糖0.2％，乳糖0.

2、1％，蔗糖0.1％。測(cè)定雙歧桿菌培養(yǎng)過程中溫度與pH的影響，結(jié)果顯示：培養(yǎng)溫度37℃、培養(yǎng)基初始pH6.5的條件下，雙歧桿菌菌體濃度最高。用改良后的培養(yǎng)基培養(yǎng)雙歧桿菌，并測(cè)定生長曲線及pH變化，得到增殖培養(yǎng)的最適終止時(shí)間約為24h。 3．實(shí)驗(yàn)確定了雙歧桿菌的最適離心條件：在4℃，轉(zhuǎn)速5000r/min條件下離心10min，BLR(乳酸雙歧桿菌)與BIY(嬰兒雙歧桿菌)的離心得率分別為98.7％和97.2％。 4．篩選得到

3、4種效果較好的保護(hù)劑，通過正交實(shí)驗(yàn)得到復(fù)合保護(hù)劑的最佳配比：10％的菊糖，6％的大豆蛋白，12％的海藻糖，10％的甘露醇的組合對(duì)BLR起到最佳保護(hù)效果。對(duì)于BIY最優(yōu)配方為：菊糖8％，大豆蛋白8％，海藻糖12％，蔗糖8％。 5．實(shí)驗(yàn)確定了擠壓法制備雙歧桿菌微囊的最佳工藝。對(duì)BLR而言，最佳制備條件是：海藻酸鈉濃度3％，CaCl2濃度2％，海藻酸鈉溶液與菌懸液體積比例1∶1，固定化時(shí)間60min。BIY的微囊化最佳條件為：海藻酸鈉

4、濃度3％，CaCl2濃度1％，海藻酸鈉與菌液量比例1∶1，固定化時(shí)間40min。在以上條件下制備加入復(fù)合保護(hù)劑的雙歧桿菌凍干微囊的菌體存活率分別為71.2％(BLR)與70.3％(BIY)。 6．乳化法制備雙歧桿菌微囊的最佳工藝是：海藻酸鈉濃度3％，菌膠比1∶2，乳化時(shí)間10min，轉(zhuǎn)速800r/min，此工藝條件下，在制備雙歧桿菌微膠囊時(shí)加入復(fù)合凍干保護(hù)劑得到凍干微囊的菌體存活率為71.9％(BLR)與71.7％(BIY)。

5、 7．以阿拉伯膠與β-環(huán)糊精為壁材，加入四種保護(hù)劑(大豆蛋白，蔗糖，菊糖，甘油)，以BLR為芯材，進(jìn)行噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度130℃，排風(fēng)溫度70-80℃，塔內(nèi)溫度80℃，物料收集溫度40℃。所得微囊的回收率是57.8％，相對(duì)菌體存活率為59.7％。 8．幾種微囊化方法制備得到的雙歧桿菌微膠囊，基本可在45min內(nèi)溶解于人工腸液中。人工胃液處理4h后，乳化法凍干微囊的活菌率為37.9％(BLR)與40.6％(BIY)。經(jīng)0.3

6、％膽鹽處理3h后，其存活率是68.1％(BLR)與67.9％(BIY)。6％的NaCl溶液處理12h，微囊的活菌率達(dá)到82.6％(BLR)與82.1％(BIY)。65℃高溫環(huán)境中貯存2h后取出測(cè)定BLR與BIY的凍干微囊仍有8.2％與8.1％的活菌率。各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果均明顯高于對(duì)照。-18℃，4℃，20℃，37℃四種溫度下貯藏180d后測(cè)定活菌數(shù)，乳化法凍干微囊于-18℃條件下保藏效果最好，活菌數(shù)可以達(dá)到2.27×109cfu/g(BL