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1、目的:觀察高糖環(huán)境誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大過(guò)程中芳香烴受體(AhR)表達(dá)情況,并探討其可能的作用機(jī)制。
方法:以體外培養(yǎng)的大鼠心肌細(xì)胞 H9C2為研究對(duì)象,實(shí)驗(yàn)分為四組:在正常糖濃度對(duì)照組、高糖組、DMSO組(高糖+AhR阻滯劑對(duì)照組)、白藜蘆醇組(高糖+AhR阻滯劑)。免疫熒光染色觀察AhR表達(dá)情況,羅丹明標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽染色細(xì)胞骨架并計(jì)算細(xì)胞表面積, DCFH-DA法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)生成水平,熒光定量 PCR及Wester
2、n blot檢測(cè)AhR、CYP1A1、ANP、BNP表達(dá)情況。
結(jié)果:(1)AhR在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)情況:正常糖濃度環(huán)境下,AhR主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì),高糖刺激時(shí),轉(zhuǎn)入細(xì)胞核內(nèi)。(2)細(xì)胞表面積染色:高糖刺激可使心肌細(xì)胞肥大,加入白藜蘆醇后,心肌肥大得到明顯改善。(3)ROS檢測(cè):與正常糖濃度對(duì)照組對(duì)比,高糖環(huán)境下,心肌細(xì)胞內(nèi)ROS含量增加,加入白藜蘆醇后ROS生成水平明顯減少。(4)熒光定量PCR及Western blot檢測(cè)結(jié)果:
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