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1、南京理工大學(xué)碩士學(xué)位論文精氨酸脫亞氨基酶基因克隆及在大腸桿菌中表達(dá)姓名:茅立華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):生物化工指導(dǎo)教師:李大力20050501塑—里一——堡主堡蘭CloningandexpressionofArginineDeiminasegeneinEeoliABSTRACTAsoneofthenonproteinaminoacids,citrullineplaysa11importantroleintheureacycleCitru
2、llinealsohasalotofimportantphysiologicalfunctionsintheareasuchaSpharmaceuticals,cosmeticetcArgininedeiminase(ADI)isallenzymewhichcancatalyzetheiminehydrolysisofargininetoproducecitrullineandammoniaItisadeclinetouseADIint
3、hecitrullineproductionindustryExpressingADIgeneinEcoliisalleffectivewaytogetADIFirstlyADIgenewasclonedfromtheDNAofPseudomonasputidabyPCR,thentheclonedgene嘲constructedwith腳asmidpET30aandpBV220andtransformedintoEcoliBL21(D
4、E3)andJMl09ThetweeomNnantstrainswerenamedasBL21(DE3)QET30aci0andJMl09(pBV220一tit)respectivelyTheDNAsequenceofclonedgenehad10%differencefromthatofPseudomonasputidaATCC4359inGenBank,whiletheaminoacidssequenceofclonedgeneWa
5、SthesamewithPseudomonasputidaATCC4359UndertheinductionofO1%IPTGtheexpressionofBL21(DE3)(pET30acit、showed2357U/mLenzymeactivityHowever,theADIenzymeactivityofJMl09(pBV220ciOhadnotbeendetectedTheresultofSDSPAGEshowedthatthe
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