GNB3、COMT基因單核苷酸多態(tài)性與老年腸易激綜合征的相關(guān)性研究.pdf

1、背景和目的:腸易激綜合征(irritable bowel syndrome，IBS)是一種常見的慢性功能性腸道疾病。近幾年，患病率逐年上升，據(jù)報(bào)道，在歐洲和北美為10％～20％，亞洲國(guó)家為5％～15％。部分亞洲國(guó)家的IBS流行病學(xué)調(diào)查提示老年人IBS的患病率較年輕人有上升趨勢(shì)。迄今為止，IBS的發(fā)病機(jī)理尚未完全明確，關(guān)于老年人群IBS的發(fā)病機(jī)制研究甚少。目前，關(guān)于遺傳多態(tài)性的研究已成為IBS研究的一個(gè)新熱點(diǎn)。
　　G蛋白是倍受關(guān)注

2、的第二信使之一，是一些參與調(diào)節(jié)胃腸道運(yùn)動(dòng)和分泌功能的重要神經(jīng)遞質(zhì)受體的信號(hào)傳遞分子。由α、β、γ三個(gè)不同的亞基組成，G蛋白β3亞基(G-protein beta3 subunit，GNB3)基因編碼G蛋白β3亞基，該基因C825T位點(diǎn)的多態(tài)性可影響G蛋白β3亞基的表達(dá)，從而影響G蛋白的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能。國(guó)外有數(shù)篇報(bào)道支持GNB3基因C825T位點(diǎn)的基因多態(tài)性與IBS相關(guān)。兒茶酚氧位甲基轉(zhuǎn)移酶（catechol-O-methytransfer

3、ase，COMT）是兒茶酚胺（如多巴胺、去甲腎上腺素以及腎上腺素）降解的關(guān)鍵酶。一項(xiàng)瑞典的研究發(fā)現(xiàn)，COMT基因val158met位點(diǎn)的基因多態(tài)性與IBS相關(guān)。但尚需在其他人種中進(jìn)一步證實(shí)。
　　本研究以老年IBS為研究對(duì)象，以病例對(duì)照研究方法，應(yīng)用TaqMan技術(shù)檢測(cè)GNB3基因C825T位點(diǎn)以及COMT基因val158met位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性(single-nucleotide polymorphism，SNP)。首次分析G

4、NB3基因、COMT基因的單核苷酸多態(tài)性與漢族人群IBS之間的關(guān)系，探尋老年IBS發(fā)病的分子遺傳機(jī)理，為判斷老年IBS易感人群提供客觀依據(jù)。
　　對(duì)象與方法:1、將研究對(duì)象分為IBS組和對(duì)照組。IBS組共66例患者，來(lái)自于門診及住院老年患者，根據(jù)羅馬Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)入選。根據(jù)癥狀對(duì)入選的IBS患者分型并分為三個(gè)亞組:(1)腹瀉型IBS(IBS-D)(2)混合型IBS(IBS-M)(3)便秘型IBS(IBS-C)。對(duì)照組115例患者，為同期門

5、診或住院的非IBS的老年人，與IBS組年齡性別等一般情況匹配，所有入選者年齡均≥60歲。
　　2、收集患者的一般資料，對(duì)所有入選者進(jìn)行老年抑郁量表(GeriatricDepression Scale，GDS)檢測(cè)。所有入選者抽取外周靜脈血2ml，自外周靜脈血中提取基因組DNA。采用Taqman技術(shù)進(jìn)行SNP位點(diǎn)檢測(cè)，分析GNB3基因C825T以及COMT基因val158met的單核苷酸多態(tài)性。用卡方檢驗(yàn)或Fisher確切概率檢驗(yàn)比

6、較各基因型和等位基因頻率在IBS組和對(duì)照組、IBS各亞組和對(duì)照組、以及IBS腹痛和病程分組間的分布差別。用非條件Logistic回歸分析兩基因的交互作用。P＜0.05被認(rèn)為有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果:1、IBS組和對(duì)照組在性別、年齡、婚姻狀況、GDS評(píng)分等方面比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P＞0.05)。
　　2、在IBS組中，GNB3基因C825T的CC、CT、TT基因型分布頻率分別為75.8％、19.7％和4.5％;對(duì)照組分別為8

7、0％、18.3％、1.7％;IBS組和對(duì)照組之間C825T基因型的分布頻率比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.534)。兩組間等位基因頻率比較亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.323)。
　　3、在IBS組中，COMT基因val/val、val/met、met/met基因型分布分別為86.4％、1.5％和12.1％;對(duì)照組分別為87.8％、11.3％、0.9％; IBS組和對(duì)照組之間val158met基因型的分布頻率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.001)

8、。兩組間等位基因分布頻率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，IBS組met等位基因出現(xiàn)的頻率大于對(duì)照組(P=0.040)。
　　4、IBS組中，IBS-D、IBS-M、IBS-C三種亞型分別占69.7％、19.7％和10.6％。IBS各亞組分別和對(duì)照組比較，GNB3基因C825T的基因型在IBS各亞組和對(duì)照組間的分布頻率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;兩等位基因在IBS各亞組和對(duì)照組間的分布頻率亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　5、COMT基因val158met基因型在I

9、BS-D組和對(duì)照組之間的分布頻率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.001)，met等位基因在IBS-D組中出現(xiàn)的頻率有高于對(duì)照組的趨勢(shì)(P=0.052)。val158met基因型在IBS-M組、IBS-C組和對(duì)照組之間的分布頻率比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，兩等位基因在IBS-M組、IBS-C組和對(duì)照組間的分布頻率比較亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　6、在IBS組中，分別將病人分成輕度腹痛和嚴(yán)重腹痛2組，結(jié)果顯示，GNB3基因C825T的基因型和等位基因頻率在

10、兩組間的分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　COMT基因val158met基因型和等位基因頻率在兩組間的分布亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　7、IBS組中，其病程≥5年的患者占39.4％，將患者按病程分為≥5年與＜5年，結(jié)果顯示， GNB3基因C825T的基因型和等位基因頻率在兩組間的分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。COMT基因val158met的基因型在兩組間的分布頻率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。met等位基因在病程≥5年的患者中出現(xiàn)的頻率高于病程＜5年的患者(P=0.0

11、22)。
　　8、GNB3基因與COMT基因的基因多態(tài)性對(duì)老年IBS發(fā)病不存在交互作用(P＞0.05)。
　　結(jié)論:1、在老年人群中，GNB3C825T的單核苷酸多態(tài)性與IBS的發(fā)病無(wú)相關(guān)性。COMT基因val158met的單核苷酸多態(tài)性可能與IBS易感性相關(guān)。met等位基因攜帶者更易成為IBS的易感人群。
　　2、亞組分析，COMT基因val158met的單核苷酸多態(tài)性與腹瀉型IBS易感性相關(guān)。
　　3、GNB