甲基化EGCG類似物的設(shè)計(jì)合成及抗腫瘤MDR活性研究.pdf

1、化療是一種重要的腫瘤治療方法,但腫瘤細(xì)胞多藥耐藥(multidrug resistance, MDR)的出現(xiàn)使化療面臨嚴(yán)峻的挑戰(zhàn),甚至引起化療的失敗。腫瘤MDR是指腫瘤細(xì)胞對一種抗腫瘤藥物產(chǎn)生耐藥性時會對其他未接觸過的,結(jié)構(gòu)及作用機(jī)制不同的藥物產(chǎn)生交叉耐藥性。腫瘤MDR產(chǎn)生機(jī)制有很多種,其中研究最深入的包括為ABC(ATP-binding-cassette)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族,與MDR相關(guān)的ABC跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白即藥物外排泵主要有三種:乳腺癌耐藥

2、蛋白(BCRP)、多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)和P糖蛋白(P-gp)。P-gp,BCRP和MRP三者結(jié)構(gòu)相似,但外排的藥物不同。其中又以P-gp在三中轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白中作用機(jī)制研究最深入。P-gp抑制劑根據(jù)藥物選擇性、發(fā)展時間和活性大小可分為三代:以維拉帕米為代表的Ca2+通道抑制劑等為第一代 P-gp抑制劑,其缺點(diǎn)主要是選擇性差,毒副作用大;第二代為第一代的衍生物,包括PSC833,右維拉帕米等,第二代較第一代P-gp結(jié)合能力強(qiáng),但第二代P-g

3、p抑制劑作用于P-450,干擾藥物代謝,限制了其應(yīng)用;第三代P-gp抑制劑主要包括Zosuquidar(LY335979),Tariquidar(XR9576)等,選擇性較好,毒副作用低,具有良好的開發(fā)前景,目前已有多種進(jìn)入臨床試驗(yàn)。
　　高效、高特異性 MDR逆轉(zhuǎn)劑已經(jīng)成為人們研究的熱點(diǎn),雖然第三代 P-gp抑制劑選擇性較好,但是也存在體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果不夠理想等一系列問題,所以高特異性、高效、低代謝酶影響、低藥代動力學(xué)影響的 P-g

4、p抑制劑仍急待研發(fā)。本課題組多年來致力于腫瘤MDR的研究,已取得一定成果,設(shè)計(jì)合成了一系列海洋生物堿 Ningalin B、槲皮素以及EGCG(表沒食子兒茶素沒食子酸酯)的甲基化類似物,并對所合成的化合物進(jìn)行了MDR逆轉(zhuǎn)活性評價。
　　EGCG為茶多酚的主要活性成分,本課題組前期對 EGCG進(jìn)行了甲基化修飾,其MDR逆轉(zhuǎn)活性顯著增強(qiáng),并以此為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)合成了一系列EGCG的全甲基化結(jié)構(gòu)類似物,其中多種化合物可逆轉(zhuǎn)人體乳腺癌耐藥細(xì)胞株

5、 LCC6MDR對紫杉醇(paclitaxel)的耐藥,甚至RF可達(dá)48.2,并且沒有發(fā)現(xiàn)毒副作用,而陽性對照藥維拉帕米的 RF僅為3.8。本論文在實(shí)驗(yàn)室已有研究成果的基礎(chǔ)上,依據(jù)P-gp介導(dǎo)的MDR機(jī)制,以EGCG及兒茶素(C)為原料,通過改變?nèi)谆疎GCG的C-3位側(cè)鏈基團(tuán)、C-3立體構(gòu)型、C-2位立體構(gòu)型以及B環(huán)上甲氧基數(shù)目,采用半合成的方法合成了22個全新的甲基化EGCG類似物,所合成的化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確證和以 P-gp為靶點(diǎn)

6、的 MDR逆轉(zhuǎn)活性測試,其中15個化合物已完成P-gp介導(dǎo)的MDR逆轉(zhuǎn)活性測試,其中14個化合物的MDR逆轉(zhuǎn)活性高于陽性對照藥維拉帕米(RF=3.8),1μM化合物34可逆轉(zhuǎn)人體乳腺癌細(xì)胞株LCC6對paclitaxel的耐藥,其RF可達(dá)53.6。其中已經(jīng)完成細(xì)胞毒測試的6個化合物結(jié)果表明所合成的化合物均無明顯細(xì)胞毒性,4個化合物已經(jīng)完成EC50測試,最低可達(dá)140nmol,Therapeutic index高于714,顯示所合成的化合