大豆多肽的酶解法制備.pdf

1、采用堿性蛋白酶Alcalase和風(fēng)味蛋白酶Flavourzyme作為工具酶對(duì)大豆分離蛋白進(jìn)行水解制備了低分子量的大豆多肽產(chǎn)品，并對(duì)大豆多肽的分離純化進(jìn)行了研究。 通過(guò)單因素分析以及正交實(shí)驗(yàn)，對(duì)pH、溫度、底物濃度、酶量、反應(yīng)時(shí)間等幾個(gè)重要水解參數(shù)進(jìn)行分析，得到了Alcalase蛋白酶水解大豆蛋白的最適條件為：底物濃度8％(w/w)，溫度60℃，pH值為8.0，酶濃度為(E/S)為3.6Au/100g。 采用交聯(lián)葡聚糖凝膠

2、SephadexG-15層析法測(cè)定大豆蛋白水解液的分子量分布，以0.05mol/LHAC-NaAC(pH3.7)溶液為凝膠層析洗脫液，流速為0.4mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。當(dāng)?shù)鞍酌窤lcalase反應(yīng)時(shí)間為2h時(shí)，水解液中的物質(zhì)分子量大部分集中在300～1500Da之間。利用高壓液相色譜(HPLC)進(jìn)行對(duì)照分析，初步探討了HPLC在大豆多肽分析中應(yīng)用的可行性。 利用風(fēng)味蛋白酶Flavourzyme對(duì)大豆蛋白的Alcal

3、ase水解液進(jìn)一步水解，進(jìn)行脫苦研究。通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定了Flavourzyme的最佳水解條件：pH7.0，溫度50℃，酶與底物比E/S為20LAPU/g，水解2h便可將苦味值降到2。大豆蛋白水解液的水解度DH為24.2％，蛋白質(zhì)回收率為73.2％。 通過(guò)純化處理實(shí)驗(yàn)，確定了脫色、脫鹽的最佳條件：活性炭的添加量為溶液量的1.2％(w/w)；711、732陰陽(yáng)離子交換樹(shù)脂的比例為2：3(V/V)，溶液的處理量為5倍的陰離子交換樹(shù)脂體積。