獲得性鹽敏感大鼠腎臟CLC-K2、NKCC2和NCC的表達(dá)的改變及鹽攝入對(duì)其影響.pdf

1、目的:觀察血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的鹽敏感性大鼠，腎臟CLC-K2、NKCC2和NCC表達(dá)量的改變，及高鹽、低鹽飲食對(duì)其表達(dá)量的影響。
　　方法:以皮下輸注425ng.kg-1.min-1AngⅡ的SD大鼠為實(shí)驗(yàn)組，正常SD大鼠作為對(duì)照組。2周后將實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組均分為高鹽與低鹽攝入組，分別飼以含4％Nacl的高鹽及0.01％Nacl的低鹽飼料，觀察5周，期間監(jiān)測(cè)一般項(xiàng)目、腎臟鈉、氯代謝及腎功能相關(guān)指標(biāo)，分別于飼喂高低鹽飼料2周、5周后處死

2、大鼠，以免疫組化的方法觀察腎臟CLC-K2、NKCC2和NCC表達(dá)，以熒光定量PCR及westernblot實(shí)驗(yàn)方法分別測(cè)定上述通道轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白及通道在mRNA及蛋白質(zhì)水平的的表達(dá)。
　　結(jié)果:輸注AngⅡ2周的實(shí)驗(yàn)組大鼠較對(duì)照組血壓明顯升高，(146.4±1.9)VS(109.9±4.0)mmHg(P＜0.05)，CLC-K2、NKCC2和NCC的表達(dá)無(wú)論在mRNA還是蛋白水平實(shí)驗(yàn)組均較對(duì)照組升高，CLC-K2mRNA水平:3.0

3、倍(P＜0.05)，蛋白水平:3.0倍(P＜0.05);NKCC2mRNA水平:3.2倍(P＜0.05)，蛋白水平:1.6倍(P＜0.05);NCC的mRNA水平:6.4倍(P＜0.05)，蛋白水平:2.0倍(P＜0.05)。飼喂高鹽與低鹽飼料5周后，實(shí)驗(yàn)組高鹽飲食亞組血壓進(jìn)一步升高，并維持在較高水平，(170.2±4.679mmHg)。實(shí)驗(yàn)組低鹽飲食亞組血壓逐漸下降至正常，(132.3±4.587mmHg)。對(duì)照組高鹽飲食亞組與低鹽飲

4、食亞組血壓無(wú)明顯改變，(133.7±2.741)VS(132.8±2.558)mmHg(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)組高鹽飼料亞組較低鹽飼料亞組腎臟的CLC-K2、NKCC2和NCC的表達(dá)無(wú)論在mRNA水平還是蛋白質(zhì)水平均有顯著增高，CLC-K2mRNA水平:4.2倍(P＜0.05)，蛋白水平:1.5倍(P＜0.05);NKCC2mRNA水平:2.4倍(P＜0.05)，蛋白水平:3.2倍(P＜0.05);NCC的mRNA水平:3.0倍(P＜0.

5、05)，蛋白水平:3.1倍(P＜0.05)。而對(duì)照組高鹽飼料亞組與低鹽飼料亞組腎臟CLC-K2的表達(dá)無(wú)論在mRNA水平還是蛋白質(zhì)水平均有顯著降低CLC-K2mRNA水平:0.6倍(P＜0.05)，蛋白水平:0.3倍(P＜0.05)，對(duì)照組高鹽飼料亞組與低鹽飼料亞組腎臟NKCC2、NCC的表達(dá)無(wú)論在mRNA水平還是蛋白質(zhì)水平均沒(méi)有明顯改變NKCC2mRNA水平:1.1倍(P＞0.05)，蛋白水平:1.0倍(P＞0.05);NCC的mRNA