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文檔簡介
1、目的:研究VEGF、Ang-1/Ang-2三種細(xì)胞因子對血管內(nèi)皮細(xì)胞的分化及成熟的影響,及其對CNV分化以及成熟過程影響的作用機(jī)制。
方法:在培養(yǎng)大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)加入VEGF、Ang-1/Ang-2因子后,劃痕實驗和MTT檢測對細(xì)胞遷移與增殖的影響,觀察內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)、活性、遷移能力,通過掃描、透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)、細(xì)胞間連接的改變;采用激光光凝誘導(dǎo)建立大鼠CNV動物模型后,分別玻璃體腔注射VEGF、Ang-1/Ang-
2、2,通過其眼底熒光造影與病理切片的變化觀察上述因子的作用。
結(jié)果:劃痕實驗顯示僅有VEGF時,與空白對照組細(xì)胞遷移無明顯差異,僅有Ang-1存在時,不僅不能增加RUVEC細(xì)胞的遷移作用,反較空白對照組有所減弱,僅Ang-2單獨作用時RUVEC遷移較對照組明顯增強(qiáng),當(dāng)VEGF與Ang-1或Ang-2聯(lián)合作用時,RUVEC遷移較對照組明顯增強(qiáng);MTT實驗結(jié)果表明:單純加入VEGF或Ang-1或Ang-2的任何一種因子,都不能起到有
3、效促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用;聯(lián)合應(yīng)用VEGF+Ang-1/VEGF+Ang-2可有效促進(jìn)增殖,提高Ang1或Ang2的濃度,效果傾向于更明顯,增加VEGF的濃度達(dá)到相似的效果;而僅聯(lián)合應(yīng)用Ang-1+Ang-2無促進(jìn)細(xì)胞增殖作用,在此基礎(chǔ)上增加VEGF才能有效促進(jìn)細(xì)胞增殖。動物實驗顯示血管生成素-1組比對照組晚期滲漏明顯減少,VEGF組較對照組晚期滲漏明顯增加;組織病理切片顯示實驗組瘢痕形成,VEGF組和對照組可見肉芽組織。
結(jié)
4、論:VEGF與Ang-1雖然是血管形成過程中始動并且使之持續(xù)的重要因子,但僅有VEGF并不能有效促使內(nèi)皮細(xì)胞遷移與增殖;同樣Ang-1雖然被認(rèn)為是維持血管穩(wěn)性的因子,但其作用也必須是在VEGF存下才能發(fā)揮出來;Ang-2單獨作用時僅可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖;當(dāng)VEGF與Ang-1/Ang-2聯(lián)合應(yīng)用時,可有效促內(nèi)皮細(xì)胞遷移與增殖,發(fā)揮促血管生成作用。血管生成素1能抑制脈絡(luò)膜新生血管的生成。血管生成素1能促進(jìn)新生的脈絡(luò)膜新生血管成熟,促進(jìn)瘢痕形
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