FoxO3a-p27kip1信號(hào)輛在白藜蘆醇抑制AngⅡ誘導(dǎo)HA-VSMC增殖機(jī)制中的作用.pdf

1、目的:探討FoxO3a/p27kip1信號(hào)軸是否介導(dǎo)白藜蘆醇抑制AngⅡ誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞增殖、遷移作用。
　　方法:體外培養(yǎng)人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞HA-VSMC，不同濃度AngⅡ、白藜蘆醇或二者聯(lián)用干預(yù)HA-VSMC，MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性，臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定白藜蘆醇抑制HA-VSMC的作用是否由藥物的細(xì)胞毒性引起，劃痕愈合法檢測(cè)細(xì)胞遷移能力。Western blot檢測(cè)AngⅡ、白藜蘆醇或二者聯(lián)用作用不同時(shí)間對(duì)HA-VSMC細(xì)胞F

2、oxO3a、p-FoxO3a、p27kip1表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:1.AngⅡ干預(yù)HA-VSMC48h，當(dāng)濃度≥10-7mol/L時(shí)細(xì)胞增殖活性明顯增強(qiáng)，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，濃度與HA-VSMC細(xì)胞相對(duì)活力呈正相關(guān)，r=0.91，P=0.01。
　　2.白藜蘆醇干預(yù)HA-VSMC48h，相對(duì)細(xì)胞活力降低，與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。臺(tái)盼藍(lán)染色結(jié)果示白藜蘆醇濃度≥20μmol/L

3、時(shí)細(xì)胞活率下降，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，濃度與HA-VSMC細(xì)胞存活率呈負(fù)相關(guān)，r=-0.97，P=0.04。
　　3.白藜蘆醇預(yù)處理HA-VSMC40min，AngⅡ干預(yù)48h，AngⅡ+白藜蘆醇組細(xì)胞活力下降，視野遷移細(xì)胞平均數(shù)減少，與Ang組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，AngⅡ增強(qiáng)HA-VSMC遷移活性，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，白藜蘆醇組細(xì)胞遷移活性減弱，與對(duì)照組比較差異

4、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　4.AngⅡ呈時(shí)間依賴性上調(diào)HA-VSMC磷酸化FoxO3a蛋白表達(dá)水平，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，不影響其總蛋白表達(dá)水平。
　　5.白藜蘆醇干預(yù)下調(diào)HA-VSMC細(xì)胞磷酸化FoxO3a蛋白表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，且不影響其總蛋白表達(dá)水平。
　　6.白藜蘆醇抑制AngⅡ誘導(dǎo)FoxO3a蛋白磷酸化，與AngⅡ組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，A

5、ngⅡ下調(diào)HA-VSMC p27kip1蛋白表達(dá)，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，白藜蘆醇預(yù)處理則上調(diào)p27kip1蛋白表達(dá)，與AngⅡ組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1.AngⅡ呈濃度依賴性促進(jìn)HA-VSMC增殖，呈時(shí)間依賴性誘導(dǎo)HA-VSMC中FoxO3a蛋白磷酸化。
　　2.白藜蘆醇呈濃度依賴性抑制HA-VSMC細(xì)胞活性，有效抑制HA-VSMC中FoxO3a蛋白磷酸化。
　　3.