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1、目的:通過檢測(cè)不同類型腦血管疾病患者血清中信號(hào)素4A(Semaphor in4a,Sema4a)的表達(dá),探討將其作為標(biāo)記物指導(dǎo)診斷病情的可能性;并將人外源性Sema4 a重組蛋白刺激外周血單核細(xì)胞和U937細(xì)胞后,通過檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞因子表達(dá)和分泌的影響來探討Sema4 a在腦血管過程中的作用機(jī)制。
方法:收集不同類型腦血管疾病患者和健康查體者的血清,采用ELISA方法檢測(cè)Sema4a不同組別間血清中的表達(dá)水平,并通過各組受測(cè)者的
2、臨床資料分析其表達(dá)的意義;將獲得的人外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)以及U937細(xì)胞在體外培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng),并用不同濃度的人外源性Sema4 a重組蛋白刺激以上兩種細(xì)胞,采用熒光定量PCR、Western-blot和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法(ELISA)法檢測(cè)這兩種細(xì)胞在接受刺激后,細(xì)胞內(nèi)MMP-9和Cox-2的表達(dá)量變化。
結(jié)果:與健康對(duì)照組相比,Sema4a在短暫性
3、腦缺血發(fā)作組和腦梗死組血清中表達(dá)水平顯著升高;在腦梗死組中的表達(dá)量也要明顯高于短暫性腦缺血發(fā)作組。在腦梗死組中, Sema4 a在血清中的表達(dá)量隨著頸動(dòng)脈斑塊的穩(wěn)定性減弱而增加,也就是說其在血清中的表達(dá)隨著病情的加重和斑塊穩(wěn)定性的減弱隨之降低。在腦梗死組,Sema4a的血清表達(dá)水平在合同高血壓或有吸煙史的患者中顯著增高。將Sema4a重組蛋白刺激外周血單核細(xì)胞和U937后,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)的MMP-9和Cox-2的表達(dá)明顯升高;而MMP-9與
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