蘿卜硫素對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的:為了對抗環(huán)境中的各種損傷,細(xì)胞在進(jìn)化過程中就獲得防御這些毒性作用的復(fù)雜機(jī)制,其中最重要的細(xì)胞防御機(jī)制是通過轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子2(Nrf2)來調(diào)節(jié)的。蘿卜硫素作為Nrf2的激動劑是從十字花科蔬菜中提取出來的。目前研究已經(jīng)證實(shí)蘿卜硫素通過激活Nrf2轉(zhuǎn)錄因子產(chǎn)生抗炎抗氧化作用,從而對肺臟,腎臟,心臟以及神經(jīng)系統(tǒng)等多器官功能有著保護(hù)作用,但不同劑量的蘿卜硫素(SFN)對肝臟缺血再灌注損傷的影響尚未見報(bào)道,本研究在于探討不同劑量的

2、蘿卜硫素對肝臟缺血再灌注損傷的影響及其可能的作用機(jī)制。
　　方法:50只健康雄性SD大鼠,體重200-220g,建立大鼠肝臟缺血再灌注損傷的動物模型,通過無損傷動脈夾阻斷肝左中葉及肝左外葉的血流造成缺血損傷,取出動脈夾造成再灌注損傷。實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為5組,每組10只。Ⅰ組:假手術(shù)組,僅分離肝動脈及其門靜脈但不行阻斷;Ⅱ組:模型組,建立肝臟缺血再灌注損傷模型;Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組:即SFN1mg/kg、SFN3mg/kg和SFN5mg/kg

3、組,分別于麻醉前1小時(shí)經(jīng)腹腔注射給予蘿卜硫素1mg/kg、3mg/kg或5mg/kg,其余步驟同模型組。
　　觀察指標(biāo)包括:血清中AST、ALT水平,肝臟組織勻漿中SOD、MDA、MPO水平,肝臟組織超微結(jié)構(gòu)改變,免疫組化法檢測肝臟組織HO-1的表達(dá)水平。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x_±s)表示,組間比較采用單因素方差分析,兩兩比較采用LSD法,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果

4、:血清ALT、AST比較:與Ⅰ組比較,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清ALT、AST值明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與Ⅱ組比較,Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組血清ALT、AST值降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與Ⅲ組比較,Ⅳ組和Ⅴ組血清ALT、AST值降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與Ⅳ組比較,Ⅴ組血清ALT、AST值降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。肝臟組織勻漿中SOD、MDA、MPO水平比較:與Ⅰ組比較,Ⅱ組肝組織勻漿中M

5、DA、MPO水平明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而肝組織勻漿中SOD水平明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與Ⅱ組比較,Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組肝組織勻漿中MDA、MPO水平降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而肝組織勻漿中SOD水平升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與Ⅲ組比較,Ⅳ組和Ⅴ組肝組織勻漿中MDA、MPO水平降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而肝組織勻漿中SOD水平升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0

6、5);與Ⅳ組比較,Ⅴ組肝組織勻漿中MDA、MPO水平降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而肝組織勻漿中SOD水平升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。電鏡下觀察肝臟超微結(jié)構(gòu)結(jié)果,Ⅰ組肝組織的細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常;Ⅱ組肝組織的線粒體腫脹明顯,線粒體膜破壞,有足腫和空泡變性,線粒體嵴破壞,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較少,溶酶體和核糖體較少,細(xì)胞核結(jié)構(gòu)明顯破壞;Ⅲ組肝組織的線粒體中度腫脹,線粒體嵴少數(shù)斷裂,有少量空泡變性,細(xì)胞核結(jié)構(gòu)尚完整;IV組超微結(jié)構(gòu)改

7、變與Ⅲ組相似;V組肝組織的線粒體輕度腫脹,線粒體嵴少數(shù)斷裂,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)多,細(xì)胞核結(jié)構(gòu)完整。與Ⅰ組比較,Ⅱ組肝組織HO-1的表達(dá)無明顯差異(P>0.05);與Ⅱ組比較,Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組肝組織HO-1的表達(dá)明顯增強(qiáng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與Ⅲ組比較,Ⅳ組和Ⅴ組肝組織HO-1的表達(dá)明顯增強(qiáng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與Ⅳ組比較,Ⅴ組肝組織HO-1的表達(dá)增強(qiáng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論:蘿卜硫素處理可