房室傳導(dǎo)阻滯模式小鼠的建立.pdf

1、背景：房室傳導(dǎo)阻滯可見于部分心房顫動患者，然而其分子機制并不清楚。三年前陳等報道KCNQ1基因S140G突變可以引起家族性心房顫動，同時通過動態(tài)心電圖檢查發(fā)現(xiàn)這個家系中大部分心房顫動患者合并房室傳導(dǎo)阻滯，KCNQ1S140G突變與房室傳導(dǎo)阻滯共分離。因此我們推測房室傳導(dǎo)阻滯與心房顫動可能有相同的分子變異基礎(chǔ)。 目的：建立轉(zhuǎn)KCNQ1 S140G突變體小鼠模型，進一步明確KCNQ1 S140G突變體致心房顫動和或致房室傳導(dǎo)阻滯的病

2、理生理作用。 方法：提取正常人的心肌組織RNA，逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，亞克隆入心肌特異性表達載體，定點誘變得到KCNQ1 S140G，經(jīng)測序證實無誤后線性化借助顯微注射裝置將其注射入受精卵，移入代孕小鼠輸卵管，進行繁殖而建立人S140G突變型KCNQ1心肌特異性表達轉(zhuǎn)基因小鼠模型，對該模型進行遺傳學(xué)檢測、表達分析和表型檢測。 結(jié)果：我們成功建立了人S140G突變型KCNQ1轉(zhuǎn)基因小鼠模型，四品系轉(zhuǎn)基因模式小鼠的心臟中均高度

3、表達KCNQ1 S140G突變體，對照組未見突變表達。小鼠體表心電圖檢測發(fā)現(xiàn)65％陽性小鼠有一度、二度、高度和三度房室傳導(dǎo)阻滯事件，但未見心房顫動表型，而未含有該突變的對照小鼠既未發(fā)現(xiàn)房室傳導(dǎo)阻滯也未見心房顫動事件。 結(jié)論： 1．S140G突變型KCNQ1心肌特異性過表達可以引起小鼠房室傳導(dǎo)阻滯，但是不能復(fù)制出心房顫動表型； 2．KCNQ1的分子缺陷不但與人類心房顫動有關(guān)，而且還可引起人類和小鼠房室傳導(dǎo)阻滯；