OEA激活PPAR-α和CB2受體減輕TNF-α誘導的人臍靜脈內皮細胞相關炎癥因子和黏附分子表達的研究.pdf

1、背景:動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，As)是由多個因素造成的開始于動脈內膜的一種疾病，現如今As的發(fā)病率和致死率逐漸升高，并且發(fā)病年齡年輕化。大量的流行病學調查和實驗研究證明，高血脂、高血壓、吸煙、糖尿病等都是與As發(fā)生相關的危險因素，但關于As發(fā)生的機制一直眾說紛紜，直到1999年，ROSS等提出“As是一種慢性炎癥性疾病”的觀點，給As的研究帶來了一個全新的方向與思路。本論文的研究就是基于這個觀點，從炎癥反應的角度去

2、探索一種新的、副作用小的抗動脈粥樣硬化藥物。油酰乙醇胺（N-Oleoylethariolamine，OEA）是大麻素的一種類似物，是PPAR-α受體天然的激動劑之一，最初主要是研究OEA在調節(jié)食欲、治療肥胖癥等方面的作用。隨后的研究發(fā)現，OEA能抑制脂多糖誘導的THP-1細胞的炎癥反應。OEA減少ox-LDL誘導的人臍靜脈內皮細胞的壞死，促進入臍靜脈內皮細胞上PPAR-α受體mRNA表達的上調，還具有抑制小鼠巨噬細胞（RAW264.7）

3、C-反應蛋白、TNF-α的分泌。我們實驗室前期的研究發(fā)現OEA對TNF-α誘導的人臍靜脈內皮細胞炎癥反應有著較明顯的保護性效應，但是作用機制目前還不很清楚。故本文的研究目的主要是進一步論證OEA的抗內皮細胞炎癥反應的作用及闡明其具體機制。
　　目的:研究OEA對TNF-α誘導的人臍靜脈內皮細胞炎癥反應的保護性作用及OEA發(fā)揮作用的相關機制。
　　方法:原代提取培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞，給予不同濃度的OEA預保護處理，然后予TNF

4、-α刺激誘導內皮細胞炎癥反應，利用酶聯免疫吸附試驗、Real-time RT PCR、Westem blotting等實驗技術檢測IL-6、IL-8、VCAM-1、ICAM-1等炎癥因子及黏附分子的表達。在同樣的處理條件下，分別給予PPAR-α和CB2受體阻斷劑，檢測IL-6、IL-8、VCAM-1、ICAM-1表達的變化，并進一步探討OEA發(fā)揮抗炎及抗動脈粥樣硬化作用的機制。
　　結果:OEA呈濃度依賴性降低TNF-α誘導的HU

5、VECs中IL-6、IL-8、VCAM-1、ICAM-1的表達，當OEA濃度為100μM時效果最明顯。分別阻斷PPAR-α和CB2受體后，OEA降低IL-6、IL-8、VCAM-1、ICAM-1表達的效應減弱。不同濃度的OEA能激活PPAR-α和CB2受體，降低炎癥信號通路分子NF-κB P65的表達，且阻斷PPAR-α和CB2受體后，對NF-κB P65抑制作用減弱。另外，不同濃度的OEA對P38 MAPK和p-STAT3等炎癥信號分