抑制Notch信號對骨髓瘤細胞增殖抑制的分子機理研究.pdf

1、目的：了解Notch信號在多發(fā)性骨髓瘤中的表達情況，探討調(diào)節(jié)該信號對腫瘤增殖、凋亡的影響及可能的機制，為骨髓瘤靶向治療的開展提供實驗依據(jù)。
　　 方法：細胞免疫化學染色檢測Notch1及Hes1在骨髓瘤細胞株中的表達；應用實時熒光定量PCR檢測Notch信號相關受體Notch1-3、配體Jag1、Jag2及特異性靶基因Hes1在多發(fā)性骨髓瘤細胞U266及RPMI8226中的表達，并與健康供者來源淋巴細胞表達情況進行比較；以Jag

2、2、Hes1為指標，應用實時熒光定量PCR檢測PHI處理對骨髓瘤RPMI8226細胞株Notch信號表達的影響；MTT檢測抑制Notch信號對瘤細胞增殖的影響，流式細胞術檢測細胞周期改變，以DAPI法觀察瘤細胞形態(tài)學改變，AnnexinV-FITC染色后流式檢測細胞凋亡情況。實時熒光定量PCR檢測抑制Notch信號后PTEN、mTOR在骨髓瘤中的表達改變。
　　 結果：細胞免疫化學染色結果示Hes1在兩種骨髓瘤中均為陽性。實時熒

3、光定量PCR發(fā)現(xiàn)Notch信號在骨髓瘤細胞中的表達高于健康供者來源細胞，其中，Jag2、Hes1在兩種骨髓瘤中的表達量較健康供者來源淋巴細胞高，差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。PHI處理后，RPMI8226細胞株Jag2、Hes1表達量均出現(xiàn)劑量依賴性降低，差異具統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。抑制Notch信號后骨髓瘤細胞增殖受抑；S期細胞明顯減少，細胞周期阻滯于G0/G1期；出現(xiàn)凋亡；細胞中PTEN表達量升高，mTOR表達量降低，與

4、對照組相比，差異具統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。
　　 結論：(1)Notch信號在多發(fā)性骨髓瘤U266、RPMI8226細胞中存在異常高表達，這可能是配體異?；罨斐傻?；
　　 (2)PHI可抑制Notch信號在多發(fā)性骨髓瘤RPMI8226細胞中的表達；
　　 (3)抑制Notch信號可使骨髓瘤RPMI8226細胞增殖受抑、細胞周期停滯于G0/G1期，發(fā)生凋亡；
　　 (4)通過抑制Notch信號抑制腫瘤