心鈉素對骨髓瘤細胞增殖及微小RNA-21表達的影響.pdf

1、目的:
　　1.觀察心鈉素(ANP)對骨髓瘤細胞株(MM1.S)增殖及細胞周期的影響。2.檢測微小RNA-21(miR-21)在MM1.S細胞中的表達,探討ANP的抗腫瘤作用及其機制。
　　方法:
　　1.常規(guī)培養(yǎng)MM1.S細胞,取對數(shù)生長期的細胞進行實驗。
　　2.CCK-8法檢測不同濃度ANP作用MM1.S細胞24h、48h、72h后細胞增殖抑制情況。
　　3.流式細胞儀檢測不同濃度ANP作用MM1.S

2、細胞24h的細胞周期。
　　4.Western blot法檢測MM1.S細胞ANP受體(NPR-A、NPR-C)的表達。
　　5.qRT-PCR檢測不同濃度ANP作用前及作用MM1.S細胞24h后miR-21的表達情況。
　　結果:
　　1. ANP對MM1.S細胞具有增殖抑制作用,在24h時抑制效果最強,且在濃度(1.0-100umol/L)之間呈濃度依賴性((P<0.01)。
　　2.1.0umol/L

3、,10umol/L,50umol/L,100umol/L ANP處理 MM1.S細胞24h后,表現(xiàn)為G1期細胞比例較對照組明顯增加(P<0.01), S期、G2期細胞比例下降(P<0.05),提示ANP阻滯MM1.S細胞于G1期,并且隨著濃度增加(1.0-100umol/L),阻滯作用增強,四個濃度組間兩兩比較有統(tǒng)計學差異( P<0.05)。
　　3.MM1.S細胞存在ANP受體(NPR-A、NPR-C)的表達。
　　4.1

4、.0umol/L,10umol/L,50umol/L,100umol/L ANP作用MM1.S細胞24h后miR-21表達下調(diào),相對表達量較陰性對照組分別下降了8.6％、24.2%、37.5%和49%,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　1.ANP可抑制MM1.S細胞增殖,并呈濃度依賴性,在作用24h時抑制效果最明顯。
　　結論:
　　2. ANP阻滯MM1.S細胞于G1期,從而抑制MM1.S細胞DNA合成。