MDR1、GSTP1基因遺傳變異上皮性卵巢癌患者鉑類(lèi)化療臨床預(yù)后關(guān)系的研究.pdf

1、目的:卵巢惡性腫瘤是女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的三大惡性腫瘤之一，其中最常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤為上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer，EOC)，它在導(dǎo)致女性死亡的病因中排名第七位，患者5年生存率約30％[1]。EOC患者的治療主要包括手術(shù)和術(shù)后的輔助化療。以鉑類(lèi)為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療是EOC患者術(shù)后的一線治療方案，但患者對(duì)鉑類(lèi)的耐藥嚴(yán)重影響了化療療效，成為治療EOC的一大障礙。鉑類(lèi)耐藥可能受累于多種機(jī)制，個(gè)體遺傳因素所導(dǎo)致的對(duì)藥

2、物的反應(yīng)差異在治療中起著重要作用。
　　P-糖蛋白是一種膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，它位于細(xì)胞漿膜，可將細(xì)胞內(nèi)的化療藥物泵出細(xì)胞外，使細(xì)胞內(nèi)藥物濃度下降，增加了腫瘤細(xì)胞的耐藥性。P-糖蛋白表達(dá)水平的高低可能導(dǎo)致上皮性卵巢癌患者對(duì)鉑類(lèi)藥物的應(yīng)答和預(yù)后的差異，而編碼P-糖蛋白的基因即為多藥耐藥基因1(multidrugresistance1，MDR1)。同樣，細(xì)胞對(duì)藥物代謝解毒功能的改變亦與鉑類(lèi)耐藥密切相關(guān)。鉑類(lèi)藥物進(jìn)入細(xì)胞后在谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶P

3、1(glutathione-S-transferases P1，GSTP1)的催化下可與谷胱甘肽(glutathione，GSH)形成復(fù)合物，該復(fù)合物毒性降低且易于被轉(zhuǎn)運(yùn)出細(xì)胞，有利于鉑類(lèi)藥物從尿液或膽汁中排出，從而達(dá)到代謝解毒的功能[2]。位于MDR1、GSTP1基因的遺傳變異可能通過(guò)改變其所編碼蛋白質(zhì)的表達(dá)，進(jìn)而影響患者對(duì)鉑類(lèi)藥物的應(yīng)答及臨床預(yù)后。
　　本研究擬探討MDR1和GSTP1基因遺傳變異與上皮性卵巢癌患者鉑類(lèi)耐藥及臨

4、床預(yù)后的關(guān)系。旨在尋找上皮性卵巢癌患者鉑類(lèi)化療的分子標(biāo)志物，為臨床的“個(gè)體化”治療提供重要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　方法:采用回顧性病例研究方法，病例為2001年12月至2010年6月期間在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院婦科進(jìn)行治療的上皮性卵巢癌患者(225例)。術(shù)前采集外周靜脈血5ml，以蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取基因組DNA，采用連接酶檢測(cè)反應(yīng)(LDR)檢測(cè)上皮性卵巢癌患者的MDR1基因C3435T、G2677T/A和GSTP1基因A3

5、13G這3個(gè)SNP位點(diǎn)的基因型和等位基因頻率分布情況。所有患者均經(jīng)過(guò)3年隨訪。判定患者臨床預(yù)后的指標(biāo)包括患者對(duì)鉑類(lèi)化療的應(yīng)答、總生存時(shí)間(overallsurvival，OS)和疾病無(wú)進(jìn)展生存期(progression-free survival，PFS)。
　　數(shù)據(jù)分析采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。采用x2檢驗(yàn)檢測(cè)基因型和等位基因與鉑類(lèi)化療應(yīng)答的關(guān)系;以logistic regression方法計(jì)算相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)度的比值比(o

6、dds ratio，OR)及其95％可信區(qū)間(confidence interval，CI);生存分析采用Kaplan-Meier法，各因素水平間比較用Log-rank及Breslow分析，Cox回歸模型進(jìn)一步分析預(yù)后相關(guān)因素（患者年齡、腫瘤分化程度、病理類(lèi)型、臨床分期、殘余病灶）。P＜0.05作為差異有顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。
　　結(jié)果:
　　1.MDR1基因C3435T、G2677T/A和GSTP1基因A313G三個(gè)多態(tài)位點(diǎn)的基因

7、型和等位基因頻率分布在鉑類(lèi)化療應(yīng)答組與不應(yīng)答組之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　2.MDR1基因C3435T與上皮性卵巢癌患者臨床生存預(yù)后的關(guān)系:患者以復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組分類(lèi)進(jìn)行生存分析，C/C、C/T、T/T三種基因型在復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組的頻率分布分別為35.8％、47.0％、17.2％和26.4％、57.1％、16.5％，經(jīng)Kaplan-Meier單因素分析兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，進(jìn)一步的Cox回歸多因素分析

8、亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);以生存組和死亡組分類(lèi)，三種基因型頻率分布分別為31.6％、52.9％、15.4％和32.6％、48.3％、19.1％，Kaplan-Meier單因素分析和Cox回歸多因素分析顯示均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　3.MDR1基因G2677T/A與上皮性卵巢癌患者臨床生存預(yù)后的關(guān)系:G/G、G/T、A/G、A/A、A/T、T/T六種基因型在復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組的頻率分布分別為:17.9％、29.1％、

9、14.2％、2.2％、18.7％、17.9％和8.8％、35.2％、13.2％、2.2％、17.6％、23.1％。以T/T基因型和非T/T基因型進(jìn)一步分類(lèi)，在復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組的頻率分布分別為:17.9％、82.1％和23.1％、76.9％。Cox回歸多因素分析，復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.01，HR=3.27，95％ CI=1.36-7.88)。以生存組和死亡組分類(lèi)，頻率分布分別為:14.0％、33.1％、14.0％、1

10、.5％、17.6％、19.9％和14.6％、29.2％、13.5％、3.4％、19.1％、20.2％，經(jīng)Kaplan-Meier單因素分析和Cox回歸多因素分析，6種基因型的頻率分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　4.GSTP1基因A313G與上皮性卵巢癌患者臨床生存預(yù)后的關(guān)系:患者以復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組分類(lèi)進(jìn)行生存分析，A/A、A/G、G/G三種基因型的頻率分布分別為:56.7％、38.1％、5.2％和64.8％、31.9％、3.3％，以Kap

11、lan-Meier單因素分析和Cox回歸多因素分析均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);三種基因型在生存組和死亡組的頻率分布分別為60.3％、37.5％、2.2％和59.6％、32.6％、7.9％，以Kaplan-Meier單因素分析和Cox回歸多因素分析比較亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.MDR1基因C3435T、G2677T/A和GSTP1基因A313G多態(tài)可能與上皮性卵巢癌患者鉑類(lèi)化療應(yīng)答無(wú)關(guān)。