抗DR5單克隆抗體對(duì)佐劑型關(guān)節(jié)炎大鼠模型的作用分析及機(jī)制探討.pdf

1、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthrifis， RA)是以關(guān)節(jié)慢性炎癥為特征的自身免疫性疾病。雖然RA的確切發(fā)病機(jī)制還不清楚，但是T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和滑膜成纖維細(xì)胞在關(guān)節(jié)發(fā)炎及疾病發(fā)展的過程中處于重要地位。細(xì)胞因子、Th1/Th2細(xì)胞平衡、細(xì)胞凋亡等在RA的發(fā)病過程中也起著重要作用。RA與滑膜組織中多種淋巴細(xì)胞及滑膜成纖維細(xì)胞凋亡不足有關(guān)，因此誘導(dǎo)這些細(xì)胞凋亡防止其過度增殖成為治療RA的有效途徑。

2、 TRAIL(TNF related apoptosis inducing ligand)為II型跨膜蛋白，屬于TNF超家族。TRAIL能誘導(dǎo)表達(dá)TRAIL特異性受體的細(xì)胞發(fā)生凋亡。DR5又稱TRAIL-R2，是TRAIL的特異性受體，在多種腫瘤組織中高表達(dá)。而TRAIL給藥后造成嚴(yán)重的肝毒性，限制了它的應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)室通過可溶性DR5(sDR5)免疫小鼠，建立雜交瘤細(xì)胞系，篩選出能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的抗DR5單克隆抗體。該單克隆抗體與DR5

3、特異結(jié)合，不與其他TRAIL受體交叉反應(yīng)。而且該單抗能特異性誘導(dǎo)一些表達(dá)DR5的腫瘤細(xì)胞凋亡。 為了研究Anti-DR5 mAb對(duì)大鼠佐劑型關(guān)節(jié)炎(AA)的作用及其免疫機(jī)理，本實(shí)驗(yàn)采用注射弗氏完全佐劑的方法建立了佐劑型關(guān)節(jié)炎(AA)大鼠模型，尾靜脈注射Anti-DR5 mAb，觀察大鼠關(guān)節(jié)腫脹度、血清和滑膜液中炎癥細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平的變化。另外，利用RT-PCR檢測(cè)各組織器官、滑膜和淋巴細(xì)胞中DR5

4、mRNA水平的表達(dá)，以Western blot技術(shù)分析各組織器官中凋亡相關(guān)因子Caspase-8、Bcl-2蛋白的表達(dá)情況。 實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Anti-DR5 mAb能緩解AA病情，使關(guān)節(jié)腫脹度降低。用Anti-DR5 mAb治療后，血液和滑膜組織細(xì)胞產(chǎn)生IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平下降，且抑制了滑膜細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的過度增殖。因此，本實(shí)驗(yàn)室制備的Anti-DR5 mAb能用于大鼠AA的治療，其治療機(jī)制與細(xì)胞表面DR5 mRNA