一個(gè)新的抗人DR5單克隆抗體的腫瘤殺傷活性與作用機(jī)制的研究.pdf

1、TRAIL(tumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand)發(fā)現(xiàn)于1995年，是腫瘤壞死因子(TNF)超家族的一個(gè)新成員，它因能夠特異地誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡而對大多數(shù)正常細(xì)胞沒有毒性而備受人們的關(guān)注。DR5是TRAIL的受體之一，屬于TNF受體超家族。與Fas相似，DR5也能夠被一些特異的單克隆抗體激活而引起腫瘤細(xì)胞死亡。此類的單抗己初步顯示出了在癌癥治療方面的潛力。我們在研究中篩選出

2、了一個(gè)新的小鼠抗人DR5單抗——AD5-10，該抗體在體外無交聯(lián)劑的條件下能夠誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞凋亡，而且表現(xiàn)出很好的體內(nèi)腫瘤殺傷活性。AD5-10和TRAIL在與DR5的結(jié)合中沒有競爭，兩者的聯(lián)合使用能顯著增強(qiáng)對腫瘤細(xì)胞的殺傷力。我們對TRAIL和AD5-10的作用進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)AD5-10在Jurkat細(xì)胞中既能夠引起Caspase依賴的細(xì)胞死亡又能夠通過Caspase非依賴的途徑殺死細(xì)胞，而TRAIL只能引起Caspase依賴的細(xì)

3、胞死亡。另外，AD5-10在激活JNK/p38MAPK和對NF-κB活性的調(diào)控方面與TRAIL也不盡相同。我們的研究首次發(fā)現(xiàn)了DR5能夠介導(dǎo)Caspase非依賴的細(xì)胞死亡，并首次展示了DR5與不同的細(xì)胞外蛋白作用時(shí)能夠在同一細(xì)胞系中激活不同的信號途徑。　　本文對人DR5的胞外區(qū)的結(jié)構(gòu)和功能做了初步的研究，確定了DR5分子上兩個(gè)TRAIL結(jié)合位點(diǎn)在一級結(jié)構(gòu)上的位置。　　本文還克隆出了抗人DR4和抗人DR5兩個(gè)小鼠單抗成熟蛋白全編碼區(qū)的