COX-2對棕櫚酸或油酸誘導(dǎo)重新脂化HSC-T6Acsl家族基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　本章主要探討棕櫚酸或油酸對重新脂化HSC-T6的影響及COX-2在棕櫚酸或油酸誘導(dǎo)的HSC-T6重新脂化過程中對各種Acsl表達(dá)影響。
　　方法:
　　1、使用含有200 mmol/L棕櫚酸或20μg/ml油酸的DMEM培養(yǎng)基處理HSC-T6；油紅O染色檢測棕櫚酸和油酸干預(yù)48小時(shí)后HSC-T6細(xì)胞內(nèi)脂滴的變化，觀察棕櫚酸和油酸對HSC-T6細(xì)胞重新脂化的影響。
　　2、利用本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建的pYr-1.1

2、-COX-2 shRNA，將其轉(zhuǎn)染至HSC-T6中，然后在熒光顯微鏡下觀察并評估其轉(zhuǎn)染效率。
　　3、Western Blot：COX-2 shRNA干擾COX-2的表達(dá)后再分別給予棕櫚酸或油酸處理細(xì)胞，Western blot檢測各組HSC-T6細(xì)胞內(nèi)COX-2，Acsl1，Acsl3，Acsl4， Acsl5，Acsl6的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、200 mmol/L棕櫚酸或20μg/ml油酸干預(yù)48小時(shí)后均能夠

3、促進(jìn)HSC-T6內(nèi)脂滴的增多；棕櫚酸干預(yù)組脂質(zhì)沉積明顯高于空白對照組，兩者比較具有顯著性差異（P<0.05）；油酸干預(yù)組脂質(zhì)沉積明顯高于空白對照組，兩者比較具有顯著性差異（P<0.05）。
　　2、轉(zhuǎn)染48h后COX-2 shRNA在熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率達(dá)70％以上，符合本實(shí)驗(yàn)要求。
　　3、200 mmol/L棕櫚酸或20μg/ml油酸能夠上調(diào)了HSC-T6中COX-2的表達(dá)；油酸干預(yù)組明顯高于空白對照組，兩者比較具有

4、顯著性差異（P<0.05）；棕櫚酸干預(yù)組明顯高于空白對照組，兩者比較具有顯著性差異（P<0.05）；與棕櫚酸處理組或者油酸處理組比較，COX-2 shRNA+棕櫚酸和COX-2shRNA+油酸明顯降低了COX-2的表達(dá)，兩者比較具有顯著性差異（P<0.05）。
　　4、200 mmol/L棕櫚酸或20μg/ml油酸能夠上調(diào)HSC-T6中Acsl1，Acsl5, Acsl6的表達(dá)，具有顯著性差異（P<0.05）；棕櫚酸處理組和油酸處

5、理組均對Acsl3、Acsl4的表達(dá)無作用，統(tǒng)計(jì)無意義（P>0.05）；與棕櫚酸處理組和油酸處理組比較， COX-2 shRNA+棕櫚酸組和COX-2shRNA+油酸組進(jìn)一步上調(diào)Acsl5、Acsl6的表達(dá)，具有顯著性差異（P<0.05）；與棕櫚酸組和油酸組比較，COX-2 shRNA+棕櫚酸組和COX-2 shRNA+油酸組對Acsl1、Acsl3、Acsl4的表達(dá)無作用，統(tǒng)計(jì)無意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、