Ucn3及CRF受體在大鼠低氧厭食中的作用.pdf

1、高原低氧可引起人們多種生理反應(yīng)，如頭昏、心悸、氣短以及食欲下降等，特別是低氧引起的厭食反應(yīng)更加重了其對(duì)機(jī)體正常代謝的干擾和正常生理功能的傷害。促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素家族(CRFfamily)的重要生理功能是整合各種應(yīng)激信號(hào)并做出相應(yīng)的應(yīng)答反應(yīng)，維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸(HPA軸)功能、神經(jīng)內(nèi)分泌功能和自主神經(jīng)系統(tǒng)功能。研究表明CRF家族的成員參與了攝食行為和能量平衡調(diào)節(jié)。為了研究高原環(huán)境對(duì)機(jī)體應(yīng)激系統(tǒng)的影響，我

2、們采用低壓艙模擬低氧應(yīng)激的方法，研究低氧對(duì)大鼠攝食行為的影響及下丘腦VMH(ventromedialhypothalamicnucleus)區(qū)Ucn3和CRFR2在低氧影響攝食行為中的作用，并對(duì)NPY參與的低氧下攝食的適應(yīng)機(jī)制作了初步探索。 我們實(shí)驗(yàn)室的研究已經(jīng)證明了低氧應(yīng)激可激活HPA軸，表現(xiàn)為下丘腦PVN區(qū)CRFmRNA表達(dá)水平增高以及下丘腦CRF分泌增加，血漿ACTH和皮質(zhì)酮升高，而下丘腦AVPmRNA下降，但低氧對(duì)Ucn

3、3和CRFR2基因表達(dá)的影響以及Ucn3和CRFR2是否介導(dǎo)了低氧引起的攝食抑制反應(yīng)尚未見(jiàn)報(bào)道。本文首先模擬了5km連續(xù)低氧(10.8％O2)應(yīng)激，測(cè)試了5km連續(xù)低氧對(duì)大鼠攝食行為和體重的影響；使用RT-PCR檢測(cè)了低氧應(yīng)激下大鼠下丘腦VMH區(qū)Ucn3和CRFR2mRNA表達(dá)的變化。為了研究CRF家族成員在低氧應(yīng)激影響攝食行為中的作用，我們通過(guò)注射CRFR1拮抗劑CP-154,526和CRFR2拮抗劑ASvg-30研究了CRFR1和C

4、RFR2參與的攝食行為調(diào)節(jié)。為了探討低氧下攝食行為的適應(yīng)機(jī)制，我們通過(guò)免疫組織化學(xué)和RT-PCR研究了弓狀核區(qū)NPY蛋白和mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：(1)5km連續(xù)低氧對(duì)大鼠攝食和體重的影響5km連續(xù)低氧降低低氧暴露期間大鼠的體重和攝食，其中以應(yīng)激開(kāi)始后第1天的攝食和體重下降最為明顯。5km低氧對(duì)攝食的抑制在低氧第10天恢復(fù)至對(duì)照水平，而對(duì)體重的抑制作用一直持續(xù)到實(shí)驗(yàn)結(jié)束(低氧10天)。 (2)5km連續(xù)低氧對(duì)大鼠下丘腦V

5、MH區(qū)Ucn3mRNA和CRFR2mRNA表達(dá)的 影響與對(duì)照組相比，5km低氧暴露引起VMH區(qū)Ucn3mRNA顯著上升，而VMH區(qū)CRFR2mRNA顯著下降。 (3)低氧下注射CP-154,526和ASvg-30對(duì)攝食和體重的影響5km連續(xù)低氧顯著降低低氧期間大鼠體重和攝食。與低氧組相比，低氧+腹腔注射CP-154,526(30mg/kg，連續(xù)注射5天)組動(dòng)物第1天和第2天的攝食沒(méi)有變化，第3、4、5天的攝食顯著降低。

6、 5km急性低氧4h顯著抑制大鼠的攝食。與低氧組相比，低氧+腦室注射ASvg-30組動(dòng)物攝食顯著降低，并呈現(xiàn)劑量依賴性。 兩種處理對(duì)大鼠體重均無(wú)影響。(4)低氧下注射CP-154,526和ASvg-30對(duì)血漿皮質(zhì)酮的影響5km低氧持續(xù)5天，低氧組大鼠的血漿皮質(zhì)酮水平仍顯著高于對(duì)照組。腹腔注射CP-154,526(30mg/kg，連續(xù)注射5天)部分逆轉(zhuǎn)了5km低氧引起的血漿皮質(zhì)酮升高。 急性5km低氧顯著降低12h的

7、禁食引起的血漿皮質(zhì)酮升高，腦室注射ASvg-30部分逆轉(zhuǎn)了急性5km低氧對(duì)血漿皮質(zhì)酮的降低作用。 (5)5km連續(xù)低氧下注射CP-154,526對(duì)下丘腦VMH區(qū)Ucn3和CRFR2mRNA表達(dá)的影響與對(duì)照組相比，5km連續(xù)低氧引起VMH區(qū)Ucn3mRNA水平顯著升高，CRFR2mRNA水平顯著降低。腹腔注射CP-154,526(30mg/kg，連續(xù)注射5天)逆轉(zhuǎn)了5km低氧引起的Ucn3mRNA水平升高，而對(duì)H區(qū)CRFR2mRN

8、A水平無(wú)影響。 (6)2km和5km連續(xù)低氧對(duì)ARC區(qū)NPY蛋白含量和mRNA表達(dá)水平的影響與對(duì)照組相比，2km連續(xù)低氧(16.0％O2)下，大鼠ARC區(qū)NPY蛋白含量呈現(xiàn)雙相變化，表現(xiàn)為低氧第1、2天低氧組大鼠ARC區(qū)NPY蛋白顯著下降，之后ARC區(qū)NPY蛋白逐漸升高，低氧15天后，顯著高于對(duì)照組。 與對(duì)照組相比，5km連續(xù)低氧引起大鼠ARC區(qū)NPY蛋白迅速升高。低氧第1天，低氧組大鼠ARC區(qū)NPY蛋白顯著高于對(duì)照組，

9、之后逐漸恢復(fù)至對(duì)照水平。 (7)5km連續(xù)低氧下CP-154,526對(duì)ARC區(qū)NPY蛋白含量和mRNA表達(dá)水平的影響與對(duì)照組相比，5km連續(xù)低氧降低低氧第5天ARC區(qū)NPYmRNA表達(dá)水平，在蛋白水平無(wú)顯著差異。同低氧組相比，腹腔注射CP-154,526(30mg/kg，連續(xù)注射5天)逆轉(zhuǎn)了低氧對(duì)NPYmRNA表達(dá)的抑制，在蛋白水平無(wú)顯著差異。 結(jié)論：(1)5km連續(xù)低氧顯著降低大鼠在低氧暴露期間的攝食和體重。