抗老化啤酒酵母菌株的選育.pdf

1、本文首先研究了啤酒中谷胱甘肽(GSH)含量與啤酒抗氧化性能之間的關(guān)系。并以此為依據(jù)，利用紫外和硫酸二乙酯對啤酒酵母S5進行誘變，篩選GSH生成量提高的突變株，并對突變株的發(fā)酵性能和抗氧化性能進行初步研究。以提高啤酒抗氧化性能為目的，又對酵母硫代謝轉(zhuǎn)錄調(diào)控基因(MET4)在實驗室酵母YS58和啤酒酵母S5中的多拷貝表達(dá)進行了研究。
　　 通過往市售啤酒中添加不同量的GSH，并測定不同GSH濃度下啤酒的抗氧化性能，結(jié)果表明，隨著啤酒

2、中GSH含量的提高，啤酒的二苯苦基肼基(DPPH)自由基清除率升高，硫代巴比妥酸(TBA)值下降，風(fēng)味保鮮值(RSV)值升高。說明GSH在啤酒中是一種有效的抗氧化劑，且小含量的GSH就能提高啤酒的風(fēng)味穩(wěn)定性。
　　 以啤酒酵母S5為研究對象，經(jīng)紫外誘變和硫酸二乙酯(DES)誘變后，獲得突變株SC67，其GSH胞內(nèi)生成量為15.238mg/L，胞內(nèi)含量為11.292mg/g，較S5分別提高了91.4％和57.8％。SC67發(fā)酵所得

3、啤酒中胞外谷胱甘肽含量(6.43mg/L)較S5(1.35mg/L)顯著提高，且抗氧化性能也有所增強，其中DPPH自由基清除率提高13.2％；TBA值下降7.1％；RSV值提高了49.2％。
　　 利用PCR的方法擴增啤酒酵母S5帶有自身500bp啟動子的MET4基因，并與附加型質(zhì)粒YEp352相連接構(gòu)建重組質(zhì)粒Y-M，轉(zhuǎn)化實驗室酵母YS58；另外將YEp352與銅抗性基因CUP1相連接，在此基礎(chǔ)上再連接MET4，構(gòu)建重組質(zhì)粒Y