產(chǎn)毒性大腸桿菌蛋白質(zhì)Tat轉(zhuǎn)運系統(tǒng)功能的研究.pdf

1、本文利用一步法基因缺失方法，敲除了產(chǎn)毒性大腸桿菌(Enterotoxic Escherichia coli，ETEC)10407菌株的tatABC基因，研究了該基因?qū)TEC10407的生理和致病力的影響。 研究發(fā)現(xiàn)，tatABC基因缺失后，ETEC10407出現(xiàn)形態(tài)學(xué)改變，在顯微鏡下表現(xiàn)為串狀排列；在LB液體培養(yǎng)基的生長速度明顯變慢；使用半固體培養(yǎng)基技術(shù)發(fā)現(xiàn)，其動力喪失。在使用家兔腸段結(jié)扎試驗發(fā)現(xiàn)，tatABC基因缺失后，ET

2、EC10407菌株產(chǎn)生腸段液體蓄積及腸粘膜損傷的能力減弱。上述表現(xiàn)在tatABC缺失株重新獲得克隆到質(zhì)粒上的tatABC基因后基本恢復(fù)。 采用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，研究了tatABC基因缺失對ETEC10407表達(dá)蛋白的影響。通過使用雙向電泳分離菌體和上清蛋白成分，使用MALDI-TOF-MS對分離的蛋白進(jìn)行了鑒定，發(fā)現(xiàn)tatABC基因缺失株有15個低表達(dá)蛋白的。研究發(fā)現(xiàn)，tatABC基因缺失影響鞭毛素的表達(dá)，可能和動力喪失的表現(xiàn)型有