長鏈非編碼RNA HOTAIR驅(qū)動食管癌惡性表型及作為臨床預(yù)后判斷標(biāo)志的研究.pdf

1、目的:長鏈非編碼RNA HOTAIR表達(dá)于HOXC基因簇上，先前的研究表明它能夠同時結(jié)合PRC2復(fù)合體和LSD1-CoREST-REST復(fù)合體從而參與染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的調(diào)控，并能調(diào)控促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因表達(dá)。臨床研究表明，在多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中，HOTAIR的過表達(dá)可以作為一個預(yù)示腫瘤進(jìn)展和病人預(yù)后的有力的標(biāo)志;然而，HOTAIR在食管癌中的表達(dá)與病人預(yù)后及其調(diào)控的分子機(jī)制仍不清楚，所以本研究旨在研究HOTAIR在食管癌中的功能和意義。

2、
　　方法:我們使用實(shí)時定量PCR的方法在100例食管癌標(biāo)本，56例非配對的正常食管組織標(biāo)本及食管癌腫瘤細(xì)胞系中檢測HOTAIR的表達(dá)水平;在本研究中進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)，包括細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)、非依賴錨著克隆生長實(shí)驗(yàn)、CCK-8實(shí)驗(yàn)、Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)、AnnexinⅤ細(xì)胞凋亡等實(shí)驗(yàn)來研究過表達(dá)和抑制HOTAIR對食管癌細(xì)胞的生物學(xué)行為的影響;應(yīng)用裸鼠來研究HOTAIR的表達(dá)水平對食管癌細(xì)胞的體內(nèi)成瘤的影響;應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片

3、和人類甲基化芯片來研究HOTAIR在食管癌細(xì)胞中參與基因表達(dá)調(diào)控及相應(yīng)的甲基化改變情況。
　　結(jié)果:與正常食管組織相比，HOTAIR的表達(dá)水平在食管癌組織和食管癌細(xì)胞系中呈現(xiàn)高表達(dá)且HOTAIR的表達(dá)水平與病人的疾病分期和生存時間具有相關(guān)性;在KYSE510和KYSE180細(xì)胞中，用小干擾RNA抑制HOTAIR的表達(dá)能夠顯著抑制細(xì)胞的增殖、侵襲轉(zhuǎn)移、細(xì)胞周期進(jìn)程并能增加細(xì)胞對凋亡的敏感性;在裸鼠中，抑制HOTAIR同樣可以抑制腫瘤

4、的生長和轉(zhuǎn)移?；蛐酒芯勘砻鱄OTAIR在食管癌細(xì)胞中參與調(diào)控一系列基因的表達(dá)，基因功能分析表明這些基因在腫瘤發(fā)生發(fā)展中具有重要的作用，包括涉及細(xì)胞侵襲、細(xì)胞周期調(diào)控。比較基因表達(dá)譜和基因的甲基化譜顯示在食管癌中HOTAIR調(diào)控的基因表達(dá)中，只有一小部分是由于HOTAIR改變了基因的甲基化狀態(tài)所導(dǎo)致的。
　　結(jié)論:HOTAIR的表達(dá)在食管癌中顯著上調(diào)，且HOTAIR促進(jìn)食管癌細(xì)胞的增殖、侵襲轉(zhuǎn)移。HOTAIR參與一系列調(diào)控腫瘤發(fā)