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1、第一部分:飼料脂肪酸組分對(duì)OLETF大鼠糖、脂代謝的影響. 目的:觀察不同脂肪酸組分的飼料對(duì)Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty(OLETF)大鼠糖、脂代謝的影響。 方法:以標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)50 只、雄性O(shè)LETF大鼠和20只雄性Long-Evans TokushimaOtsuka (LETO)大鼠(對(duì)照組) 至14周,取OLETF大鼠和LETO大鼠各10只,進(jìn)行基線研究。隨后將40只OLETF
2、大鼠隨機(jī)均分為4組,分別以標(biāo)準(zhǔn)飼料(A組)、高脂飼料(C組)、高脂富含n-6多不飽和脂肪酸(PUFA)飼料(D組)和高脂富含n-3PUFA飼料(E組)喂養(yǎng),LETO大鼠10只以標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng),直至24周。每二周一次記錄大鼠24小時(shí)進(jìn)食量及體重。第14周和第24周測(cè)定當(dāng)天隔夜禁食,采用正常血糖高胰島素鉗夾技術(shù)測(cè)定大鼠葡萄糖輸注率(GIR)后二天,測(cè)定當(dāng)天隔夜禁食,實(shí)施口服糖耐量試驗(yàn)(OGTT),同時(shí)測(cè)定血清免疫反應(yīng)性胰島素(IRI)、C肽和
3、血脂譜等生化指標(biāo)。 結(jié)果: (1) 飼料中的脂肪酸組分對(duì)大鼠的進(jìn)食量、體重?zé)o明顯影響。 (2) 24周時(shí)進(jìn)食高脂富含 n-6 PUFA 飼料的 D 組大鼠的糖尿病發(fā)生率最高(10/10),而進(jìn)食高脂富含n-3 PUFA飼料的E組大鼠的糖尿病發(fā)生率最低(6/10),甚至低于進(jìn)食非高脂飼料的A組(9/10)。 (3) 進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)飼料的OLETF大鼠,24周空腹和葡萄糖負(fù)荷后血糖較14周大鼠高(P<0.05),而
4、14周和24周空腹和葡萄糖負(fù)荷后血糖以O(shè)LETF大鼠高于對(duì)照組;在予以飲食干預(yù)的大鼠中,以進(jìn)食高脂富含n-3 PUFA飼料的E組大鼠的血糖值為低,而進(jìn)食高脂富含n-6 PUFA飼料的D組大鼠的血糖值為高。 (4) 進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)飼料的OLETF大鼠,24周空腹和葡萄糖負(fù)荷后胰島素水平較14周大鼠高,而14周和24周的葡萄糖負(fù)荷后胰島素水平以O(shè)LETF大鼠高于對(duì)照組;在予以飲食干預(yù)的大鼠中,以進(jìn)食高脂富含n-3 PUFA飼料的E組大鼠的
5、胰島素水平為低,而進(jìn)食高脂富含n-6 PUFA飼料的D組大鼠的胰島素水平為高。 (5) 進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)飼料的大鼠在14周和24周之間,以及24周進(jìn)食不同飼料的大鼠之間,空腹以及葡萄糖負(fù)荷后的C肽水平無明顯改變。 (6) 以正常血糖高胰島素鉗夾技術(shù)評(píng)價(jià)大鼠的胰島素敏感性,發(fā)現(xiàn)對(duì)照組 GIR高于OLETF大鼠,而進(jìn)食非高脂飼料的A組大鼠和進(jìn)食高脂富含n-3 PUFA飼料的E組大鼠的GIR高于進(jìn)食高脂飲食的C組大鼠和高脂富含n-6
6、PUFA飼料的D組大鼠。 (7) 不同脂肪酸組分的飼料對(duì)大鼠血脂譜無明顯影響。 結(jié)論:OLETF大鼠較對(duì)照組的血糖水平高,而胰島素敏感性差。進(jìn)食高脂富含n-3 PUFA飼料,可改善OLETF大鼠的糖代謝和胰島素敏感性,并且對(duì)β細(xì)胞功能有一定的保護(hù)作用。 第二部分:飼料脂肪酸組分對(duì)OLETF大鼠心肌及主動(dòng)脈TGF-β<,1>基因表達(dá)的影響 目的:觀察不同脂肪酸組分的飼料對(duì)OLETF大鼠心肌組織及主動(dòng)脈TGF
7、-β<,1>基因表達(dá)的影響。 方法:以標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)50只雄性O(shè)LETF大鼠和20只雄性LETO大鼠(對(duì)照組)至14周,取OLETF大鼠和LETO大鼠各10只,進(jìn)行基線研究。隨后將40只OLETF大鼠隨機(jī)均分為4組,分別以標(biāo)準(zhǔn)飼料(A組)、高脂飼料(C組)、高脂富含n-6多不飽和脂肪酸(PUFA)飼料(D組)和高脂富含n-3 PUFA飼料(E組)喂養(yǎng),LETO大鼠10只以標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng),直至24周。第14周和第24周測(cè)定當(dāng)天隔夜禁食
8、,次日測(cè)定血糖、IRI、C肽及血脂譜等生化指標(biāo)后,三天內(nèi)斷頭處死,取出心肌組織及主動(dòng)脈即刻放入液氮中冷卻以備隨后分析。采用熒光定量RT-PCR(FQ-RT-PCR)法測(cè)定14周和24周OLETF大鼠心肌組織及主動(dòng)脈TGF-β<,1>mRNA的表達(dá),并與14周對(duì)照組比較,以評(píng)價(jià)不同脂肪酸組分的飼料對(duì)大鼠心肌組織及主動(dòng)脈TGF-β<,1>基因表達(dá)的影響。 結(jié)果:本研究發(fā)現(xiàn)心肌組織及主動(dòng)脈TGF-β<,1>mRNA的表達(dá),OLETF
9、大鼠無論在14周和24周其含量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。24周時(shí),心肌組織及主動(dòng)脈TGF-β<,1>mRNA表達(dá)情況如下: D組>C組>A組>E組>對(duì)照組,各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)飼料的OLETF大鼠心肌組織及主動(dòng)脈TGF-β<,1>mRNA的表達(dá),24周顯著高于14周(P<0.05);而對(duì)照組24周與14周相比無明顯差異。 結(jié)論:不同脂肪含量和脂肪酸組分的飼料對(duì)OLETF大鼠心肌組織及主動(dòng)脈TG
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