肝細胞生長因子修飾的骨髓間充質(zhì)干細胞治療兔股骨頭壞死的實驗研究.pdf

1、目的：探討肝細胞生長因子(HGF)修飾的骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)對兔股骨頭壞死(ONFH)治療效果。
　　 材料與方法：①于兔髂嵴處獲取骨髓血，分離獲得MSCs并鑒定，傳代培養(yǎng)；以重組腺病毒肝細胞生長因子(Ad-HGF)修飾MSCs，觀察HGF分泌水平和轉(zhuǎn)染效率。②以Micro-CT、大體測量及組織學(xué)等手段觀察兔股骨近端骨性解剖特點及骨組織結(jié)構(gòu)，評估兔股骨頭鉆孔減壓可行性；模擬臨床手術(shù)，于透視下對動物進行經(jīng)皮股骨頭鉆孔減壓及

2、印度墨水注入，觀察墨水彌散情況。③90只動物靜脈注射內(nèi)毒素脂多糖10ug/kg，24h后肌注甲基強的松龍20mg/kg，1次/d，共3d。2周后觀察動物體重及血脂變化，存活動物隨機分為4組，A組為對照組，B、C、D組于透視下進行經(jīng)皮股骨頭鉆孔減壓，之后經(jīng)骨隧道分別注射生理鹽水、MSCs懸液、MsCs/Ad-HGF懸液各2mL；術(shù)后4周處死動物，觀察Micro-CT骨計量學(xué)、組織病理學(xué)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)免疫組化等項目，評估治療

3、效果。
　　 結(jié)果：①MsCs在體外可穩(wěn)定擴增、傳代并定向分化，MOI=150的Ad-HGF對MSCs轉(zhuǎn)染率高，轉(zhuǎn)染后細胞可持續(xù)分泌HGF12d。②兔股骨近端轉(zhuǎn)子窩較深，股骨頸最薄處直徑>4mm，以2mm克氏針及骨髓穿刺針可有效完成鉆孔減壓及細胞注入，印度墨水注入后分布較為均勻。③在Micro—CT主要測量參數(shù)上，MSCs/Ad-HGF處理組(D組)優(yōu)于其余3組，在骨陷窩率及骨壞死率方面顯著低于其余3組；免疫組化顯示MSCs/A