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
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文檔簡介
1、目的:掌握流式細(xì)胞儀測定外周血細(xì)胞角蛋白19(Cytokeratin19)的技術(shù),采用方法成熟、成本相對低廉的淋巴細(xì)胞分離液法聯(lián)合流式細(xì)胞儀法對外周血中的上述指標(biāo)進(jìn)行測定,判斷CK19作為循環(huán)腫瘤細(xì)胞的間接標(biāo)志物的價值,并且得出CK19在腎癌患者外周血中的表達(dá)水平以及臨床意義。
方法:選取正常人32例作為對照組,51例腎細(xì)胞癌患者作為腎癌組。首先進(jìn)行對照組和腎癌組間CK19的指標(biāo)測定,指標(biāo)選用CD45-CK19+,采用流式
2、細(xì)胞儀技術(shù)檢測上述人群外周血中CD45-CK19+的表達(dá)情況;再分析腎癌組內(nèi)CK19的表達(dá)水平與分期分級的關(guān)系;統(tǒng)計(jì)CK19陽性患者組中轉(zhuǎn)移性腎癌患者(metastaticrenal cell carcinoma mRCC)的例數(shù),分析CK19表達(dá)情況與轉(zhuǎn)移率的關(guān)系,所有入組的mRCC患者均接受手術(shù)+多吉美靶向治療,最后對于mRCC患者進(jìn)行隨訪,并測定靶向治療后6個月時CK19的表達(dá)水平,對于轉(zhuǎn)移灶的大小變化進(jìn)行測定,按照實(shí)體瘤療效評定
3、標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行歸類,即完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、疾病穩(wěn)定(SD)、疾病進(jìn)展(PD),最后將mRCC患者預(yù)后歸類,治療有效包括CR、PR、SD,無效即PD,判斷CK19水平與靶向治療療效的關(guān)系。結(jié)果參考同類試驗(yàn)中心關(guān)于CK19的相關(guān)研究結(jié)果,外周血CD45-CK19+數(shù)目低于60個/10萬細(xì)胞視為陰性表達(dá),超過上述指標(biāo)則視為陽性表達(dá)。利用SPSS13.0對不同分期、不同分級的CK19表達(dá)情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:組間比
4、較結(jié)果32例對照組中5例陽性,陽性率15.63%,51例腎癌患者組中35例陽性,陽性率68.63%,正常對照組與腎癌組CK19表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。腎癌組內(nèi)結(jié)果示T1期24例,陽性表達(dá)13例,陽性表達(dá)率為54.17%,T2期10例,陽性表達(dá)6例,陽性表達(dá)率為60%,T3期和T4期分別為8例、9例,陽性表達(dá)分別為7例、9例,陽性率分別為75%、100%,各期CK19陽性率表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),且T1+T2期
5、癌與T3+T4期癌之間的陽性表達(dá)率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05):按組織分化程度分類統(tǒng)計(jì),其中高分化組33例,陽性表達(dá)21例,陽性表達(dá)率為63.63%,中分化10例,陽性表達(dá)7例,陽性表達(dá)率為70%,低分化組8例,陽性表達(dá)7例,陽性率85%,三組CK19陽性率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),且高分化組與中低分化組之間CK19的陽性表達(dá)率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CK19陽性的患者組中腎癌轉(zhuǎn)移率高于CK19陰性組(P<0.05)。我
6、們隨訪并統(tǒng)計(jì)了mRCC患者12例,其中CK19陽性表達(dá)9例,CK19陰性表達(dá)3例,隨訪至12個月時部分緩解2例,完全緩解1例,疾病穩(wěn)定5例,疾病進(jìn)展4例。轉(zhuǎn)移性腎癌患者CK19的表達(dá)與靶向治療療效無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)(P>0.05)。
結(jié)論:流式細(xì)胞儀的方法能夠測定CK19在外周血中表達(dá)水平,并且提示CK19在不同人群的表達(dá)情況不同,健康人群低表達(dá),腎癌組高表達(dá);腎癌組內(nèi)不同分期及不同分級患者陽性率亦不同,組織分級高、分期晚的患者
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