巴馬汀抗骨關(guān)節(jié)炎作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討巴馬汀對(duì)新西蘭兔膝骨關(guān)節(jié)炎影響，并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法：在體外試驗(yàn)中，采用體外培養(yǎng)新西蘭兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞，觀察不同濃度巴馬汀對(duì)軟骨細(xì)胞的活性影響。其次，選用合適濃度的巴馬汀(0，10，25，50，100mg/L)作用于兔軟骨細(xì)胞，1小時(shí)后用IL-1β對(duì)軟骨細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)處理，并檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶-1，3，13(MMP-1，3，13)，基質(zhì)金屬蛋白酶試劑-1(TIMP-1)，二型膠原及蛋白多糖基因表達(dá)變化;同時(shí)采用W

2、nt通路激活劑(Licl)、抑制劑(DKK-1)和Hedgehog通路抑制劑（環(huán)靶明）進(jìn)行干預(yù)，研究巴馬汀對(duì)Wnt和Hedgehog信號(hào)通路的影響。在體內(nèi)試驗(yàn)中，21只新西蘭兔被隨機(jī)分成3組，分別為試驗(yàn)組，對(duì)照組及假手術(shù)組。其中試驗(yàn)組及對(duì)照組行前交叉韌帶剪斷制造膝骨關(guān)節(jié)炎模型，假手術(shù)組行假手術(shù)。試驗(yàn)組予以雙側(cè)膝關(guān)節(jié)注射最適濃度巴馬汀(100 mg/L)溶液0.3ml/次/關(guān)節(jié)，對(duì)照組注射同等劑量D-Hanks溶液，假手術(shù)組不進(jìn)行干預(yù)。每

3、周注射一次，連續(xù)注射5周后，處死動(dòng)物取膝關(guān)節(jié)標(biāo)本進(jìn)行基因及組織病理學(xué)檢測(cè)。
　　結(jié)果：體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示，巴馬汀可以顯著降低IL-1β誘導(dǎo)后軟骨細(xì)胞MMP-1，3，13基因和蛋白表達(dá)，并顯著升高TIMP-1，二型膠原酶及蛋白多糖基因和蛋白表達(dá);同時(shí)巴馬汀可以使Wnt通路中，β-catenin表達(dá)顯著降低，而DKK-1表達(dá)顯著升高，而在Hedgehog信號(hào)通路中，Ihh，Shh，Gli-2在巴馬汀干預(yù)后，表達(dá)下降。我們采用Wnt信號(hào)通