
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文檔簡介
1、目的:本課題以胃腺癌細(xì)胞株SGC7901和胃癌組織為研究對象,通過檢測Wnt5a、β-catenin、E-cadherin mRNA和蛋白在正常胃黏膜細(xì)胞株GES-1及胃腺癌細(xì)胞株SGC7901中的表達(dá),結(jié)合Wnt5a在胃癌和癌旁遠(yuǎn)端正常組織的表達(dá),探究Wnt5a的表達(dá)在胃癌發(fā)生和發(fā)展中的作用,揭示W(wǎng)nt5a、β-catenin、E-cadherin在胃癌細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的作用,為胃癌的臨床免疫治療帶來新的希望,建立更加有效的治療方法。<
2、br> 方法:體外培養(yǎng)正常胃黏膜細(xì)胞株GES-1及胃腺癌細(xì)胞株 SGC7901,Realtime-PCR技術(shù)測定其Wnt5a、β-catenin、E-cadherin mRNA的表達(dá);Western-blot法檢測其Wnt5a、β-catenin、E-cadherin蛋白的表達(dá)。同時,收集臨床上未經(jīng)化療和放療的胃癌標(biāo)本55例,行臨床病理組織分型和臨床分期,同時取遠(yuǎn)端癌旁組織28例(均證實無癌細(xì)胞)為正常對照,行常規(guī)石蠟包埋、切片,免疫
3、組化法(SP法)檢測胃癌組織和癌旁組織Wnt5a的表達(dá)。
結(jié)果:(1)在正常胃黏膜細(xì)胞GES-1及胃腺癌細(xì)胞SGC7901均可檢測到Wnt5a、β-catenin、E-cadherin mRNA的表達(dá)及Wnt5a、β-catenin、E-cadherin蛋白的表達(dá)。(2) SGC7901細(xì)胞的Wnt5a、β-catenin mRNA和蛋白表達(dá)水平均高于正常胃黏膜上皮細(xì)胞株GES-1(P<0.01),而GES-1細(xì)胞的E-cad
4、herin mRNA和蛋白表達(dá)水平高于SGC7901細(xì)胞(P<0.01)。(3)免疫組化SP法檢測Wnt5a的表達(dá),結(jié)果顯示,胃癌組織和癌旁組織中均有Wnt5a的表達(dá),但胃癌組織Wnt5a的蛋白表達(dá)陽性率顯著高于遠(yuǎn)端癌旁的胃黏膜組織,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);55例胃癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)與患者性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)系(P<0.05),而與患者的年齡、腫瘤大小、腫瘤發(fā)生部位均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
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