遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥的致病基因研究.pdf

1、遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥(hereditary hemorrhagic telangiectasia,HHT)是常染色體顯性遺傳的血管性疾病,在北美的發(fā)病率達(dá)1:5000~8000,表現(xiàn)為皮膚黏膜毛細(xì)血管擴(kuò)張和臟器動(dòng)靜脈畸形。鼻出血和胃腸道出血是黏膜常見表現(xiàn),受累的臟器包括肺臟,肝臟和大腦。HHT的臨床診斷主要依據(jù)臨床表現(xiàn):鼻出血,皮膚黏膜的毛細(xì)血管擴(kuò)張,內(nèi)臟的動(dòng)靜脈畸形和家族史;分子診斷根據(jù)ENG基因、ACVRL1基因和SMAD4基

2、因的檢測(cè)結(jié)果。臨床確診病人的突變檢出率為68-78％,且基因檢測(cè)不受年齡及臨床表現(xiàn)的限制,可保證診斷時(shí)效性及準(zhǔn)確性。
　　目的:研究HHT患者的遺傳學(xué)病因及發(fā)病機(jī)制,評(píng)估分子診斷的敏感度,了解中國(guó)HHT患者的突變頻譜。
　　方法:2012年5月~2014年1月來我科就診的HHT可疑患者,經(jīng)病史采集、體格檢查及內(nèi)臟血管動(dòng)靜脈畸形篩查后,共有10個(gè)家系(80人)納入研究。簽署知情同意書后進(jìn)行基因檢測(cè)。由靜脈血提取全基因組DNA,

3、 ENG基因、ACVRL1基因和SMAD4基因進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增及測(cè)序。對(duì)檢測(cè)到的相關(guān)突變,分析其致病性。對(duì)突變位點(diǎn)行物種間進(jìn)化保守性分析。在100名正常對(duì)照中進(jìn)行突變篩查。對(duì)致病突變體蛋白三維結(jié)構(gòu)建模,分析其功能變化。
　　結(jié)果:8個(gè)臨床確診家系中的6個(gè)檢測(cè)到致病突變,分子診斷敏感度為75%,與其他同類研究一致。14例突變中,ACVRL1突變12例,5例新突變分別是第3外顯子的錯(cuò)義突變、第8外顯子的插入突變、第5內(nèi)含子的缺失

4、突變和第1、9內(nèi)含子的單核苷酸變異。ENG突變共2例,1例新突變是位于第7外顯子的錯(cuò)義突變。
　　結(jié)論:
　　1.分子診斷的高靈敏度有利于HHT的早期診斷。
　　2.中國(guó)HHT患者的ACVRL1基因突變遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于ENG基因,這點(diǎn)與北美與歐洲地區(qū)差異明顯,表明國(guó)人突變頻譜的特點(diǎn)。
　　3.ACVRL1突變多見于第3和第8外顯子,ENG基因突變多見于第7、8外顯子,符合歐美地區(qū)研究結(jié)果。
　　4.明確基因新突變的