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文檔簡介
1、目的： 探討胰蛋白酶抑制劑烏司他丁在大鼠胰島分離純化中的作用． 方法： 用含0.5mg/ml膠原酶的Hanks溶液灌注大鼠胰腺。實(shí)驗(yàn)組在消化液中添加烏司他丁5000U/ml；對照組：消化液中不含烏司他丁。充分消化后，200目不銹鋼網(wǎng)過濾，將胰島提取物低溫離心洗滌2-3次；Ficoll400不連續(xù)密度梯度離心純化。低溫離心洗滌2-3次后得到胰島。光鏡觀察胰島形態(tài)，以DTZ染色鑒定胰島并計(jì)算純度(得率)AO-PI染色
2、檢測胰島活性，糖刺激試驗(yàn)判定胰島功能，將各組分離出的胰島進(jìn)行比較。 結(jié)果： 實(shí)驗(yàn)組得到的胰島數(shù)量是(291.81±25.83)個．對照組為(225.59±20.88)個．加用烏司他丁分離出的胰島在形態(tài)、數(shù)量方面均優(yōu)于對照組(P＜0.01)。實(shí)驗(yàn)組在45 mm內(nèi)每10個胰島細(xì)胞在低糖和高糖刺激下分泌的胰島素濃度分別為(28.75±2.55)μIU/ml/10 is-let/45 min和(84.50±3.46)μIU/ml
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