哮喘KL-6表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過觀察哮喘小鼠血清、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中KL-6(krebs．von den Iungen-6)的表達(dá)，卡介苗(bacillus calmette-guerin，BCG)干預(yù)對哮喘小鼠BALF中KL-6、白細(xì)胞介素-4(interleukin-4，IL-4)、干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)表達(dá)的影響，了解KL-6是否反映哮喘氣道炎癥程度，并探討其可

2、能作用機(jī)制。 方法：健康雄性昆明小鼠50只，隨機(jī)分成五組，每組10只。1.哮喘I組：每只小鼠用10ug卵清蛋白(ovalbumin，OVA)和1mg氫氧化鋁(Al(OH)3)腹腔注射進(jìn)行致敏，1％OVA霧化吸入進(jìn)行激發(fā)3天。2.哮喘II組：OVA致敏、激發(fā)方法同哮喘I組，但激發(fā)次數(shù)為7天。3.哮喘III組：OVA致敏、激發(fā)方法同哮喘I組，但激發(fā)次數(shù)為11天。4.BCG干預(yù)組：OVA致敏、激發(fā)方法同哮喘II組，但在OVA致敏前7、

3、3、1天每只小鼠皮內(nèi)注射BCG0．025mg。5.正常對照組：用同等劑量的生理鹽水代替OVA進(jìn)行腹腔注射和霧化吸入。所有小鼠于末次霧化吸入24小時后取材，收集BALF進(jìn)行細(xì)胞總數(shù)、嗜酸粒細(xì)胞計數(shù)；采用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assayk, ELISA)方法檢測血清及BALF中KL-6水平、BALF中IL-4和IFN-γ水平；肺組織切片行蘇木素-伊紅(HE)染色，觀察病理學(xué)改變。 結(jié)果

4、：1.肺組織病理學(xué)分析：各哮喘組肺組織中均見大量炎細(xì)胞浸潤，隨激發(fā)次數(shù)增加炎細(xì)胞浸潤漸次明顯。2.BALF中細(xì)胞總數(shù)、嗜酸粒細(xì)胞計數(shù)：各哮喘組小鼠較正常對照組BALF中細(xì)胞總數(shù)和嗜酸粒細(xì)胞計數(shù)均明顯增高，并隨激發(fā)次數(shù)的增加依次升高。 3.各哮喘組血清和BALF中KL-6水平：各哮喘組小鼠較正常對照組血清和BALF中KL-6水平均明顯增高，并隨激發(fā)次數(shù)的增加依次升高。4.與對照組比較，哮喘組、BCG干預(yù)組小鼠BALF中KL-6、IL-4均

5、升高，BCG 干預(yù)組又較哮喘組下降；哮喘組、BCG干預(yù)組小鼠BALF中IFN-γ水平較對照組均下降，BCG干預(yù)組又較哮喘組升高。5.哮喘組、BCG干預(yù)組小鼠BALF中KL-6水平與IL-4／IFN-γ均呈正相關(guān)。 結(jié)論:1.KL-6在哮喘小鼠血清和BALF中有表達(dá)，并與激發(fā)次數(shù)增加導(dǎo)致氣道炎癥加重呈正相關(guān)，可以反映哮喘病情嚴(yán)重程度。2.BCG干預(yù)可以影響哮喘小鼠BALF中KL-6的表達(dá)，KL-6水平與IL-4／IFN-γ呈正相關(guān)