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文檔簡介
1、[目的]
肺癌是世界上發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤。近年來,肺癌的發(fā)病率和死亡率有明顯增高的趨勢。在臨床上,除手術治療外,化療是治療癌癥的重要輔助治療手段。已有研究表明異茴芹內酯和佛手苷內酯具有抗腫瘤的作用。實驗通過研究研究異茴芹內酯、佛手苷內酯單用及聯(lián)合順鉑對肺癌細胞系A549、H460體外增殖和凋亡的影響,觀察異茴芹內酯和佛手苷內酯聯(lián)合順鉑是否能夠增加藥物對肺癌細胞系A549、H460細胞的凋亡,并對相關機理進行初步研
2、究。
[方法]
1.實驗細胞株選用人肺癌細胞株A4549和H460;
2.CCK-8法測定藥物在48h不同濃度對人肺癌細胞株A549和H460生長的抑制率,計算順鉑的IC50值;
3.分別檢測佛手苷內酯、異茴芹內酯、順鉑及兩種天然提取物聯(lián)合順鉑對人肺癌細胞株A549、H460細胞的凋亡作用;
4.Real Time PCR、Western blotting檢測一定濃度
3、藥物作用48h后肺癌細胞株A549、H460凋亡相關基因,對凋亡相關機制進行研究。
[結果]
1.佛手苷內酯和異茴芹內酯對肺癌A549和H460細胞的增殖有抑制作用;
2.佛手苷內酯和異茴芹內酯對A549、H460的IC50值分別為佛手苷內酯對A459細胞25.7±7.5μM、對H460細胞為4.2±2.5μM,異茴芹內酯對A459細胞78.1±19.5μM、對H460細胞為26.1±9.2μM
4、;
3.異茴芹內酯和佛手苷內酯對肺癌A549、H460的IC10值左右的抑制率分別為10μM、lμM濃度和兩種藥物該濃度下分別與順鉑IC50值聯(lián)合時與順鉑組相比較,聯(lián)合組對肺癌細胞的增殖抑制作用明顯;
4.異茴芹內酯和佛手苷內酯單用作用于肺癌A549和H460細胞能夠使細胞周期停滯;
5.異茴芹內酯和佛手苷內酯用作用于肺癌A549和H460細胞能夠誘導細胞凋亡,與順鉑聯(lián)合使用時與順鉑組比較凋亡作
5、用更明顯;
6.異茴芹內酯和佛手柑內酯聯(lián)合順鉑作用于肺癌A549和H460細胞誘導癌細胞凋亡,異茴芹內酯可能是通過上調bad、bax的表達、佛手苷內酯可能是通過下調bcl2、bcl2L1來實現(xiàn)的;
7.異茴芹內酯和佛手苷內酯誘導凋亡可能是作用于STAT3信號傳導通路來實現(xiàn)的。
[結論]
實驗運用異茴芹內酯、佛手苷內酯作用于人肺癌A549和H460細胞系、異茴芹內酯、佛手苷內酯分別聯(lián)
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