魯斯可皂苷元對(duì)人肺癌A549和H460細(xì)胞的作用機(jī)理研究.pdf

1、研究目的:探討國(guó)醫(yī)大師周仲瑛經(jīng)驗(yàn)方“周氏克金巖方”中麥冬之單體魯斯可皂苷元在抗人肺癌A549細(xì)胞和H460細(xì)胞方面的作用機(jī)制，進(jìn)一步闡述周仲瑛教授“癌毒”理論的分子生物學(xué)基礎(chǔ)，為研制新的有效的抗腫瘤藥物奠定理論基礎(chǔ)。
　　研究方法:體外培養(yǎng)人肺癌A549細(xì)胞和H460細(xì)胞，以順鉑為陽(yáng)性對(duì)照組，不同濃度魯斯可皂苷元為實(shí)驗(yàn)組，采用MTT法檢測(cè)魯斯可皂苷元對(duì)人肺癌A549細(xì)胞和H460細(xì)胞生長(zhǎng)的影響;利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)藥物作用后的細(xì)胞

2、凋亡率及周期分布情況;運(yùn)用Western Blot法檢測(cè)藥物對(duì)周期相關(guān)蛋白表達(dá)的影響;運(yùn)用Transwell小室法檢測(cè)魯斯可皂苷元對(duì)細(xì)胞侵襲能力的影響。
　　研究結(jié)果:MTT結(jié)果顯示:12.5～100umol/L的魯斯可皂苷元具有明顯的抑制人肺癌A549細(xì)胞和H460細(xì)胞增殖的作用，而且結(jié)果呈明顯時(shí)-效和量-效關(guān)系，與空白對(duì)照組相比有明顯差異。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果提示，魯斯可皂苷元作用人肺癌A549細(xì)胞和H460細(xì)胞24h后，細(xì)胞發(fā)

3、生凋亡，且凋亡率與劑量呈正相關(guān)性;而與空白對(duì)照組相比，G0/G1期細(xì)胞相對(duì)減少，S期細(xì)胞比例相對(duì)增加，說(shuō)明細(xì)胞被阻滯于S期。Western Blotting檢測(cè)結(jié)果表明，魯斯可皂苷元作用于細(xì)胞24h后，隨著藥物濃度的增加，p53和p21蛋白的表達(dá)增強(qiáng)，而同時(shí)CDK2和CyclinE2蛋白表達(dá)降低。Transwell實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)魯斯可皂苷元可以抑制肺癌細(xì)胞的侵襲能力。
　　研究結(jié)論:魯斯可皂苷元是麥冬的有效抗癌活性成分之一;魯斯可皂苷元