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文檔簡介
1、目的:腫瘤的輻射耐受制約了放療療效,第二個線粒體衍生的半胱氨酸蛋白酶激活劑(Second mitochondria-derived activator of caspase,Smac)蛋白類似物可明顯提高輻射誘導的腫瘤細胞凋亡,有望成為新型腫瘤輻射增敏藥物。本研究旨在探討新型Smac蛋白類似物ANTP-SmacN7融合肽對肺癌細胞系H460的輻射增敏作用。
方法:(1)取對數(shù)生長期肺癌H460細胞,分為空白對照組,單純照射組,
2、ANTP-SmacN7組和照射聯(lián)合ANTP-SmacN7組,單純照射組給予0、2、4、6 Gy照射,照射聯(lián)合ANTP-SmacN7組中ANTP-SmacN7的濃度為20μmol/L。(2)WST-1測定H460細胞的增殖。(3)流式細胞儀測定細胞處理后24和48h的細胞凋亡率。(4)Western blot實驗檢測caspase3和cleaved caspase3的表達水平。
結(jié)果:(1)ANTP-SmacN7融合能夠順利進入
3、細胞,且能夠增強H460細胞的輻射敏感性(F=25.1,P<0.01,增敏比為1.86)(2)照射聯(lián)合ANTP-SmacN7可明顯降低H460細胞的克隆形成率(x2=45.2,P<0.01;x2=40.3,P<0.01),提高cleaved caspase3的表達量,促進caspase3的活化,增加輻射誘導的細胞凋亡率。
結(jié)論:ANTP-SmacN7融合肽可明顯提高H460細胞的輻射敏感性,促凋亡作用這一特性與抑制XIAP的m
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