ANTp-SmacN7融合肽對(duì)H460細(xì)胞輻射增敏作用的研究.pdf

1、目的：腫瘤的輻射耐受制約了放療療效，第二個(gè)線粒體衍生的半胱氨酸蛋白酶激活劑(Second mitochondria-derived activator of caspase，Smac)蛋白類似物可明顯提高輻射誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡，有望成為新型腫瘤輻射增敏藥物。本研究旨在探討新型Smac蛋白類似物ANTP-SmacN7融合肽對(duì)肺癌細(xì)胞系H460的輻射增敏作用。
　　方法：(1)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期肺癌H460細(xì)胞，分為空白對(duì)照組，單純照射組，

2、ANTP-SmacN7組和照射聯(lián)合ANTP-SmacN7組，單純照射組給予0、2、4、6 Gy照射，照射聯(lián)合ANTP-SmacN7組中ANTP-SmacN7的濃度為20μmol/L。(2)WST-1測(cè)定H460細(xì)胞的增殖。(3)流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞處理后24和48h的細(xì)胞凋亡率。(4)Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)caspase3和cleaved caspase3的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：(1)ANTP-SmacN7融合能夠順利進(jìn)入

3、細(xì)胞，且能夠增強(qiáng)H460細(xì)胞的輻射敏感性（F=25.1，P＜0.01，增敏比為1.86）(2)照射聯(lián)合ANTP-SmacN7可明顯降低H460細(xì)胞的克隆形成率（x2=45.2，P＜0.01;x2=40.3，P＜0.01），提高cleaved caspase3的表達(dá)量，促進(jìn)caspase3的活化，增加輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡率。
　　結(jié)論：ANTP-SmacN7融合肽可明顯提高H460細(xì)胞的輻射敏感性，促凋亡作用這一特性與抑制XIAP的m