菜籽肽制備及其抗氧化活性的研究.pdf

1、油菜是我國重要的油料作物之一，菜籽粕中含有菜籽蛋白，我國現(xiàn)在多將其用于飼料和肥料，這造成了一定的資源浪費，因此加強對其的升值加工研究是一項有重要意義的工作。 本文以脫脂菜籽粕為原料制備菜籽清蛋白，再用堿性蛋白酶與木瓜蛋白酶對菜籽清蛋白進行分步水解制備菜籽肽粗品，試驗獲得了較好的菜籽清蛋白提取條件，并優(yōu)化得到了較好的分步水解制備菜籽肽粗品的條件，同時對菜籽肽粗品的抗氧化活性進行了研究。試驗獲得的主要結(jié)論如下： (1)菜籽清

2、蛋白的制備：取100g脫殼脫脂干燥菜籽粕于2L的燒杯中，加入1000mL蒸餾水，40℃下攪拌浸提1h，6000 rpm、4℃離心20 min，過濾上清液得到沉淀，按上述步驟再進行相同的浸提操作3次。合并4次所得的上清液，用1mol/LHCl沉淀上清液，調(diào)pH至4.0后6000 rm、4℃離心10 min獲得沉淀，將沉淀置于蒸餾水中透析24h，并在第8h、16h分別更換蒸餾水，然后真空冷凍干燥即可得到蛋白質(zhì)含量達82.05％的清蛋白。

3、 (2)菜籽清蛋白主要功能性質(zhì)如下：吸水性326.88％，吸油性為4.30mL油/g清蛋白，起泡性為66.00％，乳化性及乳化穩(wěn)定性分別為29.80％和35.53％。 (3)本文選用堿性蛋白酶和木瓜蛋白酶對菜籽清蛋白進行分步水解研究，在單因素試驗的基礎(chǔ)上，結(jié)合正交試驗得到雙酶水解的最佳條件為：取底物濃度3.5％的清蛋白，先用堿性蛋白酶4000U/g于溫度55℃，pH8.0的條件下，水解3h，再加入木瓜蛋白酶3000U/g，在

4、50℃，pH5.5的條件下水解3h，水解度可達到40.17％。 (4)菜籽肽粗品具有較強的還原能力，其還原能力隨其濃度的增加而增強。菜籽肽粗品具有清除超氧陰離子和抑制羥自由基的作用，其對超氧陰離子的的IC50值為6.60 mg/mL，其抗氧化作用均隨菜籽肽粗品濃度的增加而增強，并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。通過灌胃小鼠菜籽肽粗品100、200、400 mg/kg·d40天，結(jié)果顯示可以提高小鼠抗氧化能力，使小鼠肝和腎中的超氧化