血小板膜受體P2Y12基因功能性單核苷酸多態(tài)與冠心病及氯吡格雷藥物療效相關(guān)性研究.pdf

1、冠心病(coronary hean disease，CHD)是一種由多種遺傳因素和環(huán)境因素共同作用所致的多基因遺傳病。動脈粥樣硬化(atherosclerosis，As)是CHD的最主要病因，其機(jī)制至今未完全闡明。在As的形成過程中，血小板的活化及凝血纖溶系統(tǒng)異常扮演著重要的角色，與CHD的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。 血小板膜P2Y12受體(platelet membrane receptor P2Y12)基因編碼一種關(guān)鍵的G<,αi>

2、蛋白耦連受體，該受體在多種血小板功能中起重要作用。活化的P2Y12受體一方面引起血小板自身的活化，另一方面通過激活G<,i>信號傳導(dǎo)通路抑止腺苷酸環(huán)化酶，造成胞內(nèi)cAMP水平下降，同時(shí)激活P13K、Akt、Rap1b、鉀通道，引起P2Y12受體信號傳導(dǎo)下游事件的發(fā)生，包括α-顆粒的釋放和活化，血小板的GMP140的順次表達(dá)，致密顆粒分泌的纖維蛋白原一受體活化，ADP誘導(dǎo)下的血栓素A<,2>的生成，致密顆粒的釋放及促凝血機(jī)制的活化，并且促

3、進(jìn)了通過位于血小板表面GMP140的暴露而引起的炎癥反應(yīng)，因此P2Y12受體在血小板活化中起到了中心作用。此外，基因敲除小鼠模型證明，抗血小板藥物氯吡格雷(clopidogrel)靶向作用于P2Y12受體。目前，國外報(bào)道P2Y12基因的某些單核苷酸多態(tài)(single nucleotide polymorphism，SNP)可能通過改變基因表達(dá)產(chǎn)物的活性或劑量影響血小板活化水平，進(jìn)而影響不同基因型個體對CHD的易感性。另有研究顯示：對cl

4、opidogrel的反應(yīng)性差異與編碼藥物靶向受體P2Y12的基因變異有關(guān)。本研究使用創(chuàng)造酶切位點(diǎn)-聚合酶鏈反應(yīng)/限制性片段長度多態(tài)性(Created restriction site-polymerase chain reaction/restriction fragmentlength polymorphism，CRS-PCR-RFLP)技術(shù)對中國漢族非CHD個體(61例)和CHD患者(177例)P2Y12基因的2個功能性多態(tài)位點(diǎn)(C

5、34T，G52T)與CHD的相關(guān)性進(jìn)行了病例一對照研究。同時(shí)，運(yùn)用CRS-PCR-RFLP技術(shù)對73例穩(wěn)定型心絞痛(stable angina pectoris，SAP)患者P2Y12基因的C34T、G52T多態(tài)位點(diǎn)與抗血小板活化藥物clopidogrel藥物療效的相關(guān)性進(jìn)行了自身對照研究。結(jié)果如下： 1．CHD組C34T多態(tài)位點(diǎn)T突變等位基因頻率顯著高于對照組。CHD與T等位基因正關(guān)聯(lián)。將CHD組進(jìn)一步劃分為急性冠脈綜合癥(a

6、cutecoronary syndrome，ACS)組及SAP組，結(jié)果顯示ACS組T等位基因頻率明顯高于對照組，但與SAP組無顯著差異；SAP組T等位基因頻率分布高于對照組，差異具有顯著性。 2．G52T多態(tài)等位基因頻率和基因型頻率在CHD與對照組間分布差異均無顯著性。 3．CHD組與對照組比較，血小板最大聚集度(Maximum platelet aggregation ratio，MAR)、血漿P選擇素(granule

7、 membrane protein，GMPl40)、纖維蛋白原(Fibrinogen，F(xiàn)IB)水平顯著升高，凝血酶原時(shí)間(prothrombin time，PT)顯著降低。CHD組分層后，ACS組、SAP組與對照組組間兩兩比較，MAR、GMP140、FIB水平依次升高；ACS組與對照組比較，PT顯著降低，差異具有顯著性。 4．將冠心病作為應(yīng)變量，以MAR、GMP140、PT、FIB作為自變量作多元Logistic回歸分析，結(jié)果顯