豚鼠心室肌細胞膜延遲整流鉀通道電流（I-,k-）及L型鈣通道電流（I-,Ca,L-）在缺血預適應過程中的變化的實驗研究.pdf

1、該研究應用膜片鉗全細胞記錄技術,在模擬缺血及早期缺血預適應條件下對豚鼠心室肌單細胞的延遲整流鉀電流I<,k>(分為快速激活成分I<,kr>和緩慢激活成分I<,ks>)和L型鈣通道電流(I<,Ca,L>)進行分析.方法:用膠原酶Ⅰ分離出豚鼠心室肌單細胞.實驗條件設定為:(1)無預適應的缺血模型:細胞經(jīng)正常細胞外液灌流5min,記錄正常狀態(tài)離子通道電流為對照,再予模擬缺血細胞外液灌流10min,記錄缺血狀態(tài)離子通道電流.(2)缺血預適應模型

2、:細胞經(jīng)正常細胞外液灌流5min,記錄正常狀態(tài)離子通道電流為對照后,先予缺血細胞外液灌流3min,再予正常細胞外液灌流(再灌注)3min,如此重復操作2次作為缺血預適應刺激并記錄離子通道電流,再予模擬缺血細胞外液灌流10min,記錄預適應后的缺血狀態(tài)離子通道電流.該實驗共觀察記錄四組細胞:單純缺血Ik組(n=14)、缺血預適應I<,k>組(n=10)、單純缺血I<,Ca,L>組(n=12)和缺血預適應I<,Ca,L>組(n=11).結論

3、:(1)急性持續(xù)心肌缺血使I<,k>增大,且以I<,kr>的增大為主.(2)缺血預適應的刺激抑制了持續(xù)缺血時I<,k>的開放,對I<,kr>的抑制更為顯著.(3)急性持續(xù)缺血使內向I<,Ca,L>峰值電流減小,相應外向穩(wěn)態(tài)電流I<,ss>增大,穩(wěn)態(tài)激活曲線略右移,不影響最大激活電位和反轉電位.(4)缺血預適應刺激仍使I<,Ca,L>峰值電流減小,即短暫缺血后的再灌注不能使減小的I<,Ca,L>峰值恢復,但限制了IP之后的持續(xù)缺血時I<,