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文檔簡介
1、BMPs屬于TGF-β超家族的一員,在胚胎發(fā)育及骨骼形成中扮演著重要的角色。雖然如今只有幾種BMP被證實有促進骨形成的作用并應用于臨床(主要為BMP2及BMP7),但并未有報道確其認為具有最強成骨作用的BMP。本課題從兩個方面著手,一方面是從體內實驗探索BMP9的特殊的信號轉導通路:另一方面從體外實驗去證明BMP9是最強的成骨誘導因子。
第一部分是通過基因芯片、Real-time PCR、Western-Blotting等
2、方法探索BMP9是否遵循傳統(tǒng)經典BMP信號傳導通路介導骨形成的理論機制。比較BMP2、9作用下小鼠多潛能干細胞C3H10中BMP信號傳導通路核心基因Smads的表達差異;同時采用RNA干擾的方法沉默Smad4.表達以減弱經典BMP信號傳導系統(tǒng)的作用,比較BMP2、9作用下誘導C3H10體外成骨的差異。結果是與BMP2作用下C3H10中BMP信號傳導通路核心基因Smads表達皆升高相比,BMP9刺激下上述基因無明顯表達上調;Smad4基因
3、表達沉默后,BMP9誘導干細胞體外成骨的作用無明顯抑制。BMP9并不完全遵循傳統(tǒng)經典BMP信號傳導通路而發(fā)揮誘導成骨的生物學作用。
第二部分是比較腺病毒介導的人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-9(Adv-hBMP9)和.Adv-hBMP2納米羥基磷灰石/聚酰胺復合物在損傷部位的骨缺損重建修復效果。新西蘭白兔36只,隨機分成三組,制成雙側橈骨中段13mm骨缺損模型。A組:植入Adv-hBMP9+納米羥基磷灰石/聚酰胺骨;B組:植入Adv-h
4、BMP2+納米羥基磷灰石/聚酰胺骨;C組:注入Adv-GFP+羥基磷灰石/聚酰胺骨。在2,4,8,12,16周各時相點分別進行大體觀察、x線照片、組織學切片。結果是BMP9組骨缺損完全修復,BMP2組骨缺損部分修復,而GFP組骨缺損修復明顯欠佳。重組腺病毒介導的BMP9對橈骨骨缺損后的成骨修復作用強于BMP2。我們的研究為。BMP9的成骨中的作用機制及信號途徑打下一定基礎,為臨床上利用BMP9基因治療骨骼系統(tǒng)相關疾病提供更強的骨誘導因子
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